文档介绍：实****报告
实****名称
食品微生物检验实****br/>系别
生物与化学工程系
年级专业
学生姓名
指导老师
王瑶琼、吴菲菲、黄大川
邵阳学院
2013年12月10日
一、实验时间与地点
时间: 2013年下学期第13--15周
地点:邵阳学院李子园校区生物与化学工程系微生物实验室
二、实****过程概述
。
,下午再去领实验器材,清洗实验器材,烘干,包扎。
配制牛肉膏蛋白胨培养基,做无菌检查
样品中细菌的检测进行十倍稀释、接种
细菌菌落的观察及计数
配制察氏培养基,做无菌检查
样品中酵母菌的检测进行十倍稀释、接种
— 观察酵母菌落及计数
配制察氏培养基,做无菌检查
、接种
--
配制乳糖发酵培养基,做产气实验
观察产气情况
—,完成实****报告。
三、实****内容
(一)香干中细菌含量的测定:
Ⅰ、实验材料
(1)、实验器材及试剂
设备:电热恒温培养箱37℃±1℃、电磁炉、电子天平、PH试纸、吸管1ml、10ml 6个、烧杯(1000ml)一个、三角瓶(500ml、250ml)各一个、培养皿(直径90mm)9个、试管9个、试管架、酒精灯、研钵、剪刀、灭菌镊子、75%酒精棉球、量筒(500ml)、玻棒、牛角匙、高压蒸汽灭菌锅、棉花、牛皮纸、记号笔、麻绳、纱布
试剂:75%乙醇、生理盐水、1mol/L氢氧化钠溶液
(2)、牛肉膏蛋白胨培养基
配方:牛肉膏 3g、蛋白胨 10g、 NaCl 5g、琼脂 15—20g、无菌水 1000ml、pH —
配置步骤:
①称量
②溶化
③调pH
④分装
⑤加塞
⑥包扎
⑦灭菌
⑧倒平板
(3)、检样稀释及培养
①以无菌操作,将检样豆干25g剪碎、研磨以后,放于盛有225ml无菌水的三角瓶内,并在三角瓶中放入玻璃珠,经充分振摇做成1:10的均匀稀释液。
②用1ml无菌吸管吸取1:10稀释液1ml,沿管壁缓慢注入含有9ml无菌水的无菌试管内,振摇试管混合均匀,做成1:100的匀液。
③另取1ml的灭菌吸管,按上项操作顺序作10倍递增稀释液,如此每递增稀释一次,即换用1支1ml灭菌吸管。
④根据食品卫生标准要求或对检样污染情况的估计,选择3个适宜稀释度,分别在作10倍递增稀释的同时,,每个稀释度作三个培养皿。同时做好空白对照组。
⑤稀释液移入培养皿后,应及时用涂布器在培养基表面将样品均匀涂布。
⑥等琼脂凝固后,翻转培养皿,置(36±1)℃恒温箱内培养24h取出,计算平板内菌落数目乘以倍数,即得1g样品所含菌落总数。
Ⅱ、菌落计算方法
(1)菌落计数方法
做平板菌落计数时,可用肉眼观查,必要时用放大镜检查,以防遗漏。在记下各平板的菌落数后,求出同稀释度的各平板平均菌落总数。
(2)菌落计数的报告
①平板菌落数的选择
选取菌落数在30~100之间的平板作为菌落总数测定标准。一个稀释度使用三个平板,应采用三个平板平均数,其中一个平板有较大片状菌落生长时,则不宜采用,而应以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数,若片状菌落不到平板的一半,而其余的一半中菌落分布又很均匀,即可计算半个平板后乘2以代表全皿菌落数。平皿内如有链状菌落生长时(菌落之间无明显界线),若仅有一条链,可视为一个菌落数;如果有不同来源的几条链,则应将每条链作为一个菌落计。
②稀释度的选择
应选择平均菌落数在30~100之间的稀释度,乘以稀释倍数报告之。若所有稀释度平均菌落数均大于100,则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。
若所有稀释度的平均菌落数均小于30,则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。
若所有稀释度均无菌落生长,则以小于1乘以最低稀释倍数报告之。
若所有稀释度的平均菌落数均不在30~100之间,其中一部分大于100或小于30时,则以最接近30或100的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。
(3)、实验具体流程如下
检样
做几个合适的稀释度
选三个合适的稀释度,各以1ml量加入灭菌的培养基中均匀涂布
菌落计数
数据处理分析,报告
37±1℃,24h±2h
(4)、下表为实验时记录的豆干中细菌的含量数据:
样品中细菌的含量
稀释度 10-4 10-5