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2011免疫学检测实验课件.ppt

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2011免疫学检测实验课件.ppt

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2011免疫学检测实验课件.ppt

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(一)检测原理
抗原与相应抗体可发生特异性结合,并在外界条件影响下出现肉眼可见或借助仪器可检测的各种现象,如凝集或沉淀。借此可用已知抗体(或抗原)检测未知抗原(或抗体),因所采用的抗体常存在于血清中,故称为血清学反应。
Ag
Ag
Ag
Ag
Ag
Ag
Ag
Ag
(二)抗原抗体反应的特点
1、特异性
2、Ag-Ab结合的带现象与可见性
3、可逆性
Ag
V区
抗原决定基
postzone
prozone
前带现象
后带现象
4、反应的阶段性
(三)影响抗原抗体反应的因素
抗原抗体结合过程可分为两个阶段:一是特异性结合阶段,二是可见反应阶段。
1、电解质
2、温度
3、酸碱度
第二反应阶段易受三方面影响。
中性或弱碱性
370C
PH6-8
正常人体内环境
(1)直接凝集
红细胞
抗红细胞抗体(IgG)
+
凝集
用于:ABO血型测定
细菌鉴定(肥达试验)
(2)间接凝集
激素抗体
激素分子
不凝集
+
激素抗体
激素包被的乳胶颗粒
+
凝集
常用载体:绵羊红细胞、聚苯乙烯乳胶等。
用于:钩端螺旋体病、血吸虫病、类风湿关节
炎的辅助诊断。
间接血凝
(4)协同凝集实验
2、沉淀反应
可溶性抗原与相应抗体在有适量电解质存在下,出现肉眼可见的沉淀现象,称为沉淀反应。
该反应多用半固体琼脂凝胶作为介质进行琼脂扩散或免疫扩散,即可溶性抗原
与抗体在凝胶中扩散,在比
例合适处相遇形成可见的白
色沉淀现象。
(1)单向免疫扩散
(2)双向免疫扩散
(3)对流免疫电泳
(4)免疫比浊
(1)单向免疫扩散
Ab
待测血清(Ag)
不同浓度的标准血清
浓度
直径
(对数)
d’
c’
d’
(2)双向免疫扩散
Ag
Ab
将抗原与抗体分别加入琼脂凝胶的小孔中,抗原抗体会自由地向四周扩散,在它们相遇的位置形成一条沉淀线。是一种定性检测法。
Ag1
Ag1
Ab1
Ag1
Ag2
Ab1、2
Ag1
Ab1、2
Ag1、
2