09酶联免疫吸附 PPT课件.ppt

文档介绍：酶免疫技术
EIA

拟探讨的问题
ELISA的原理
ELISA的试剂(三个必要试剂)
ELISA的类型
ELISA的操作要点
酶免疫技术的定义
酶免疫技术的类型
酶免疫技术的发展
一、概念
以酶标记的抗体(抗原)作为主要试剂,将抗原抗体反应的特异性和酶催化底物反应的高效性和专一性结合起来的一种免疫检测技术。可用来检测抗体,也可检测抗原。
第一节酶免疫技术概述
二、酶免疫技术类型
酶免疫技术
酶免疫组化
酶免疫测定
均相酶免疫测定(EMIT、CEDIA)
异相酶免疫测定
液相酶免疫测定
固相酶免疫测定(如ELISA)
(一)均相酶免疫测定
利用酶标记物(抗原)结合有限抗体后,标记酶的活性就受到抑制,因而反应后不需分离结合的和游离的酶标记物,直接测定系统中的总标记酶的活性的变化,即可确定结合的酶标记物的数量,从而得到待测物的含量。
常用于半抗原如药物、激素、毒品、兴奋剂等的测定。
抗体
酶
抗体
酶
半抗原(未标记)
底物
标记抗原
酶
(1)酶免疫增强测定技术(EMIT)
DNA重组技术可分别合成某种功能酶分子的两个片段,大片段称为酶受体(EA),小分子称做酶供体(ED),两者单独均无酶活性,,测定原理为:标本中的抗原和酶供体(ED)标记的抗原与特异性抗体竞争结合,形成两种抗原抗体复合物.
ED标记的抗原与抗体结合后由于空间位阻,不能再与酶受体(EA)结合,而游离的ED标记的抗原上的ED可和EA结合,形成具有活性的酶,加入底物测定酶活性,酶活力的大小与标本中抗原含量成正比.