文档介绍：果蔬成分生化分析
作者:叶子琦指导老师:吴明江学号:**********
(温州大学生命与环境学院 11生本)
【摘要】:果蔬的营养价值为人们日常生活所关注果蔬中维生素C含量、糖含量和蛋白质含量的测定体现其营养价值所在。酶是生物反应的重要催化剂过氧化物酶的分析在遗传育种等方面有重要作用
【关键词】:豆芽,维生素C,蛋白质,总糖,还原糖,过氧化物同工酶。
Biochemical analysis of fruit and vegetable ingredients
Author: Ye Ziqi Instructs teacher: Wu Mingjiang
Student ID:**********(Class of 11 biological science,School of Life and Environmental Sciences, Wenzhou University)
Abstract: People pay much attention to the nutrition of fruit and vegetable. The determinations of vitamin C content, sugar content and protein content in fruit and vegetable reflect their value on nutrition. Enzyme is the important catalyst for biological reactions. Analysis of Peroxidase plays an important role in the field of ic breeding.
Key words: Bean sprouts、Vitamin C、Protein、Total sugar、Reducing sugar、Peroxidase isozymes
【前言】:氧化性2,6-二氯酚靛酚呈蓝色,可作为滴定显色剂去滴定还原型维生素C,滴定终点为微红色。
考马斯亮蓝G-250在酸性游离状态下呈棕红色,最大吸收峰在465nm,当它与蛋白质结合后变成蓝色,最大吸收峰在595nm。蛋白质-染料复合物在波长为595nm处的光吸收与蛋白质含量成正比。
蒽酮比色法是一个快速而简便的定糖方法。糖类在较高温下可被硫酸脱水成糠醛或糠醛衍生物,再与蒽酮缩合成蓝色化合物,在620nm处有最大吸收峰。
用聚丙烯酰胺凝胶电泳分离鉴定蛋白质,主要依赖于电荷效应和分子筛效应。再与标准样品对照即可。
、试剂与器材
新鲜的豆芽
试剂与器材
(1)维生素C的含量测定
1%的草酸溶液、2%的草酸溶液、维生素C标准液(
)、% 2,6-二氯酚靛酚溶液。
微量滴定管及架、台秤、、50mL量筒、1mL、10mL吸管、100mL锥形瓶、剪刀、滤纸
(2)总糖及还原糖含量的测定
蒽酮试剂、标准葡萄糖溶液()、6mol/L HCl溶液、20% NaOH溶液
(×2)、(×1)、(×1)、(×1)、(×3)×15cm(×7)、分光光度计、水浴锅、电子分析天平、电炉、容量瓶(100mL×1)、玻璃漏斗、量筒、研钵、三角烧瓶
(3)蛋白质含量测定(考马斯亮兰法)
标准蛋白质溶液、考马斯亮兰G-250染料试剂、 Tris-HCl缓冲液()
可见光分光光度计、旋涡混合器、试管16支
(4)过氧化物酶同工酶的分离(聚丙烯酰胺凝胶电泳)
A(分离胶缓冲液)、B(浓缩胶缓冲液)、C(分离胶贮液)、D(浓缩胶贮液)、E 核黄素、F 蔗糖、电极缓冲液、封板胶、样品提取液、染色液、%溴酚蓝
垂直板电泳槽及附件(玻璃板、硅胶条、梳子、导线等)、直流稳压稳流电泳仪、微量进样器(50μl)、高速离心机(15 000r/min)、量筒:500mL×1,10mL×1,5mL×13 \% V( t' O2 A6 ~+ o55、烧杯:250mL×4、其它常用用具(玻棒、大培养皿等)
(5)过氧化物酶活性的测定(比色法)
mol/、反应混合液
分光光度计,研钵,恒温水浴锅,100mL容量瓶,吸管,离心机
(1)维生素C的含量测定
1)制备新鲜果蔬液:洗净新鲜果蔬,擦干表面水分,剥去外皮,。放入50mL量筒中,加2%草酸液至40mL刻度处。用玻璃棒搅拌,静置10min,过滤。
2)染料液