文档介绍：铁皮石斛化学成分研究
一、前言
1、药材现状:
铁皮石斛( Dendrobium officinale Kimura et Migo)又名铁皮兰、黑节草,系兰科植物铁皮石斛的新鲜或干燥茎,分布于安徽、浙江、福建、广西和云南等
地,生于树干或岩石上。现已通过人工组培方法,大田栽培获得成功,近年在浙江、云南等地已形成较大种植规模。铁皮石斛收载于历版《中国药典》,在《中国药典》2010 年版以前均列于石斛项下,为石斛的来源之一。因石斛药材品种多,来源复杂,性状和质量差异较大,铁皮石斛的性状、化学成分等与金钗石斛、马鞭石斛等均不同,如金钗石斛含石斛碱类成分而铁皮石斛无; 金钗石斛和马鞭石斛均有苦味,铁皮石斛味淡,嚼之有黏性; 金钗石斛与马鞭石斛直径较粗,铁皮石斛直径细小; 金钗石斛和马鞭石斛一般只作黄草使用,价格便宜,而铁皮石斛加工成价格昂贵的枫斗,故于2010 年版《中国药典》将铁皮石斛从石斛中分列出来,单列为一个品种。近代研究表明,铁皮石斛具有抗肿瘤、降血糖、抗氧化等作用,在治疗胃肠道疾病和增强免疫等方面也具有较好疗效[ 1-3 ]。通过查阅文献,我们发现铁皮石斛化学成分的研究基础非常薄弱,未有系统研究铁皮石斛与非铁皮石斛在化学成分方面的差异,故有必要对其区别性成分进行系统研究。
2、化学成分研究:
从铁皮石斛中分离得到了20个化合物,分别鉴定为3, 4′2 -二羟基-5-甲氧基联苄(1) ,二氢白藜芦醇(2) , dendromoniliside E (3) , denbinobin (4) , 2, 4, 7-三羟基29, 10-二氢菲(5) ,钩状石斛素(6) , ( - ) -loliolide (7) ,腺苷(8) ,尿苷(9) ,鸟苷(10) ,蔗糖(11) , 52羟***糠醛(12) ,反式阿魏酸二十八烷基酯(13) ,对羟基反式肉桂酸三十烷基酯(14) ,对羟基顺式肉桂酸三十烷基酯(15) ,胡萝卜苷(16) ,β2谷甾醇(17) ,十六烷酸(18) ,三十一烷醇(19)及十七烷酸
(20)。[ 4 ]化合物1~20均为首次在铁皮石斛中分离得到。其中化合物1-10的化学结构式见图(1)
图(1) 化合物1~10的结构式
二、实验仪器与材料
(1)药材
药材于2006年采自于浙江省义乌市,由中国医学科学院药用植物研究所郭顺星研究员鉴定为铁皮石斛D. candidum。
(2)实验仪器与试剂
Perkin Elmer 341 旋光仪; Inova 501 及VarianUnity 600型核磁共振仪( TMS内标) ; 质谱仪(AGZAB 2F型质谱仪) ;Waters Pre LC, 2487双波长检测
器;制备色谱柱为Waters SymmetryPrep C18 column(718 mm ×300 mm, 5μm) ;柱色谱用硅胶(青岛海洋化工厂) ; GF254和HF254薄层板(烟台汇友硅胶开发有限公司) ; Sephadex LH220 和Sephadex G225( Pharmacia) ; HP2MGL 型大孔树脂(三菱) ;色谱纯试剂为Burdick&Jackson;实验所用试剂分析纯试剂均为北京化工厂生产。药材于2006年采自于浙江省义乌市,由中国医学科学院药用植物研究所郭顺星研究员鉴定为铁皮石斛
D. candidum。
挥干溶剂
三、实验步骤与结果
kg粉末
8倍量乙酸乙酯回流提取3次,, 1, 1 h
提取液
药渣
用95%乙醇回流提取1遍, 70%乙醇回流提取2遍,合并提取液减压浓缩
减压浓缩
乙酸乙酯提取物57g
(下见流程图2)
乙醇提取物350g
混悬于水中,依次用石油醚、***仿及正丁醇萃取(下见流程图3、4、5)
石油醚萃取物20 g,***仿萃取物20 g,正丁醇萃取物70 g。
流程图1
乙酸乙酯提取物57g
硅胶柱( 100 ~200目)进行分离,用石油醚-乙酸乙酯系统梯度洗脱
13个流分( Fr. 1~13)
Sephadex LH-20 (***仿-甲醇1 ∶1 ) 纯化
Sephadex LH-20 (***仿-甲醇1 ∶1 ) 纯化
化合物13(60mg)
化合物19(50mg) 和20 (30mg)
重结晶
化合物17 (4g)
硅胶柱色谱(300~400目) ,流动相用石油醚-***梯度洗脱
6 个亚流分( -)
流程图2
Sephadex LH-20 (***仿-甲醇1 ∶1 ) 纯化
Sephadex LH-20 (***仿-甲醇1 ∶1