文档介绍：手足口病的病原学及实验室检测
陈立
中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所
国家脊灰实验室
2010-04-21
手足口病的病原
引起手足口病的病毒属于小RNA病毒科肠道病毒属,包括:
*柯萨奇病毒A组(Coxasckievirus A, CVA)的 2、4、5、7、9、10、16 型等
*B组(Coxasckievirus B, CVB)的1、2、3、4、5 型等;
*肠道病毒71型(Human Enterovirus 71, EV71);
*埃可病毒(Echovirus, ECHO)等。
其中以EV71及CVA16型较为常见。
肠道病毒适合在湿、热的环境下生存与传播,75%酒精和5%来苏不能将其灭活,对***、去***胆酸盐等不敏感;对紫外线和干燥敏感,各种氧化剂(高锰酸钾、漂白粉等)、甲醛、碘酒以及56℃30分钟可以灭活病毒。病毒在4℃可存活1年,-20℃可长期保存,在外环境中可长期存活。
人肠道病毒感染的一般致病机制
进入途径
口腔/呼吸道
咽喉及下肠胃道
传播
扁桃体、深层淋巴结、肠道淋巴结
微病毒血症
先天性感染
神经系统
心脏
肝脏、
胰脏、
肾上腺
呼吸系统
皮肤及黏膜
病毒血症
神经系统
抗体产生、病毒血症消失,病毒感染症状改善
飞沫、接触、饮食
肌肉
流行病学
传染源患者和隐性感染者。发病前数天,感染者咽部与粪便就可检出病毒,通常以发病后一周内传染性最强。
传播途径:可经胃肠道(粪-口途径)传播,也可经呼吸道(飞沫、咳嗽、打喷嚏等)传播,亦可因接触患者口鼻分泌物、皮肤或粘膜疱疹液及被污染的手及物品等造成传播
流行:以5岁及以下儿童为主,尤以3岁及以下儿童发病率最高。一般5-7月为发病高峰
实验室诊断——临床诊断病例符合下列条件之一者,即可诊断为实验室确诊病例
自咽拭子或咽喉洗液、粪便或肛拭子、脑脊液、疱疹液、血清以及脑、肺、脾、淋巴结等组织标本中分离到人肠道病毒(指包括CVA16和EV71等有明确证据表明可以导致手足口病的人肠道病毒)。
自咽拭子或咽喉洗液、粪便或肛拭子等标本中检测到CVA16 或EV71特异性核酸,或从脑脊液、疱疹液、血清以及脑、肺、脾、淋巴结等组织标本等标本中检测到人肠道病毒(指包括CVA16和EV71等有明确证据表明可以导致手足口病的人肠道病毒)的特异性核酸。
病原学监测要求
各省区市卫生行政部门要组织医疗卫生机构开展病原学监测,了解病原动态分布变化。所有重症和死亡病例均需采样。此外,以县(区)为单位,每月最少需采集5例首次就诊的普通病例标本;当月县(区)病例总数少于5例时,全部采样。
以省(区、市)为单位,在手足口病流行年份中每年至少采集20对EV71 和10对CVA16感染的手足口病患儿的双份血清,以阐明和分析EV71和CVA16感染后IgG和IgM抗体的动态变化,评价血清学抗体试剂盒的敏感性和特异性。
以省(区、市)为单位,每月至少从手足口病病例中分离10株毒株并做血清型别鉴定,鉴定完成后并将毒株及鉴定结果于5个工作日内报送至中国疾病预防控制中心。具备测序条件的省份,可开展VP1基因序列测定和分析,进行基因定型,序列测定完成后将序列结果于5个工作日内报送至中国疾病预防控制中心;不具备测序条件者,将毒株送至中国疾病预防控制中心进行序列测定,中国疾病预防控制中心要于28个工作日内反馈基因定型结果。
31个省级实验室
1
国家实验室
331 个地级实验室
肠道病毒分离物基因分型,血清流行病学检测,诊断方法建立
质量控制
对省级实验室提供技术支持
肠道病毒分离和鉴定
(PCR, ICA, PCR-RFLP, real time PCR)
对地级实验室的质量控制
对地级实验室提供技术支持
RT-PCR, Real time PCR
采集标本
中国肠道病毒三级实验室网络
标本采集和检测
(1)所有重症和死亡病例均要采集标本,可以采集咽拭子、粪便或肛拭子、疱疹液、脑脊液、血清等,死亡病例还可采集脑、肺、肠淋巴结等组织标本。聚集性病例至少要采集2例病例标本开展病原学检测。
(2)医疗机构负责样本采集,疾病预防控制机构应指导医疗机构进行相关生物学标本的采集。
(3)疾病预防控制机构根据本地的技术能力,对采集的标本开展核酸检测、病毒分离;不具备技术条件时,及时送上级机构进行检测。
标本的选择
粪便标本、肛拭子(3日内,5-8g)
咽拭子标本(3日内,维持液)
血清标本(发病0-3天,14-30天)
疱疹液(多个疱疹作为一个标本)
脑脊液标本(出现神经系统症状后3天内)