文档介绍：高效大鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子
大鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子
(GM-CSF)酶联免疫分析
试剂盒使用说明书
本试剂盒仅供研究使用
产品编号:CSB-E04570r
检测范围: pg/ml- 100 pg/ml
最低检测限: pg/ml
特异性:本试剂盒可同时检测天然或重组的大鼠GM-CSF,且与其他相关蛋白无交叉反应。
有效期:6个月
预期应用:ELISA法定量测定大鼠血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中GM-CSF含量。
说明
●试剂盒保存:-20℃(较长时间不用时);2-8℃(频繁使用时)。●浓洗涤液低温保存会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。●中、英文说明书可能会有不一致之处,请以英文说明书为准。
●刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。
实验原理
用纯化的抗体包被微孔板,制成固相载体,往包被抗GM-CSF抗体的
微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗GM-CSF抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的GM-CSF呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。试剂盒组成及试剂配制
1. 酶联板(Assay plate ): 一块(96孔)。
2. 标准品(Standard): 2瓶(冻干品)。
3. 样品稀释液(Sample Diluent): 1×20ml/瓶。
4. 生物素标记抗体稀释液(Biotin-antibody Diluent): 1×10ml/瓶。
5. 辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液(HRP-avidin Diluent): 1×10ml/瓶。
6. 生物素标记抗体(Biotin-antibody): 1×120μl/瓶(1:100)。
7. 辣根过氧化物酶标记亲和素(HRP-avidin): 1×120μl/瓶(1:100)。
8. 底物溶液(TMB Substrate): 1×10ml/瓶。
9. 浓洗涤液(Wash Buffer): 1×20ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀
释25倍。
10. 终止液(Stop Solution): 1×10ml/瓶(2N H2SO4)。需要而未提供的试剂和器材
1. 标准规格酶标仪
2. 高速离心机
3. 电热恒温培养箱
4. 干净的试管和Eppendof管
5. 系列可调节移液器及吸头,一次检测样品较多时,最好用多通道移液器
6. 蒸馏水,容量瓶等
标本的采集及保存
1. 血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000 x g离心20分钟,
取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
2. 血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2 - 8° C 1000
x g离心15分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
3. 细胞培养物上清或其它生物标本:1000 x g离心20分钟,取上清即可检测,
或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。