文档介绍：维生素B12注射液含量测定
一、任务依据
【中国药典】2015版二部 P1236
维生素B12注射液
本品为维生素B12的灭菌水溶液。含维生素B12(C63H88CoN14O14P)%~%
【含量测定】避光操作。精密量取本品适量,用水定量稀释成每1mL中约含维生素B12 25μg的溶液,照紫外-可见分光光度法(通则0401),在361nm的波长处测定吸光度,按C63H88CoN14O14P的吸收系数( )为207计算,即得。
二、任务分解
1. 实验原理
紫外-可见分光光度计
紫外-可见分光光度法是通过被测物质在紫外光区或可见光区的特定波长处或一定波长范围内的的吸光度,对该物质进行定性和定量分析的光学分析方法。
定量分析通常选择物质的最大吸收波长处测出吸光度,然后用对照品或吸收系数求算出被测物质的含量,多用于制剂的含量测定。
二、任务分解

计算稀释倍数
根据维生素B12注射液【含量测定】中内容要求描述,“用水定量稀释成每1mL中约含维生素B12 25μg的溶液”。
【规格】(1)1ml: (2)1ml:
(3)1ml: (4)1ml:
(5)1ml:1mg (6)2ml:
以下均以规格2ml:
样品溶液:实际使用的维生素B12注射液
供试品溶液:按要求配制的每1mL中约含维生素B12 25μg的溶液。
二、任务分解
3. 制定计划
(1)填写所需溶液、药品及仪器
药品名称
规格
数量
用途及可用量
维生素B12注射液
2ml:
2盒
药品,1人
水
纯化水
500ml,1人
仪器清洗、溶剂
表1 维生素B12注射液含量测定所需药品
二、任务分解
3. 制定计划
(1)填写所需溶液、药品及仪器
表2 维生素B12注射液含量测定所需仪器
仪器名称
规格型号
数量
用途
紫外-可见分光光度计
北京通用T6
1台
含量测定
石英比色皿
石英
1套
含量测定
移液管
10ml
1支
溶液配制
容量瓶
100ml
2支
溶液配制
洗瓶
500ml
1支
洗涤、稀释
小烧杯
100ml
1个
稀释
胶头滴管
2ml
1支
定容
大烧杯
500ml
1个
废液杯
洗耳球
塑料
1个
移液
二、任务分解
3. 制定计划
(3)操作步骤
测定步骤
操作内容
数据记录

1. 杂散光的检查
、吸光度准确度检定。
3. 杂散光的检查
定期检查

精密量取一定体积定量稀释成规定浓度的溶液。
供试品的名称、批号、生产厂家。

使用的石英吸收池必须洁净。当吸收池中装入同一溶剂,在规定波长测定各吸收池的透光率,%以下者可配对使用,否则必须加以校正。
二、任务分解
3. 制定计划
(3)操作步骤
测定步骤
操作内容
数据记录

将溶剂置1cm石英吸收池中,以空气为空白(即空白光路中不置任何物质)测定其吸收光度
溶剂空白吸收=

除另有规定外,在规定的吸收峰±2nm处,再测几点的吸光度,吸光度最大的波长应在规定的波长±2nm以内,并以吸光度最大的波长作为测定波长。
测定波长= nm

、测定液装于吸收池中。
,测定吸光度,记录。
A1=
A2=

%
%
标示量%=
平均百分含量%

,得出结论。
±%以内。
相对偏差=
结论: