文档介绍：紫外可见分光光度法——光的吸收定律
一. Lambert-Beer 定律——光吸收基本定律“ Lambert-Beer 定律”是说明物质对单色光吸收的强弱与吸光物质的浓度(c)和液层厚度(b)间的关系的定律,是光吸收的基本定律,是紫外-可见光度法定量的基础。
Lambert定律——吸收与液层厚度(b)间的关系
Beer 定律——吸收与物质的浓度(c)间的关系
“ Lambert-Beer 定律”可简述如下:
当一束平行的单色光通过含有均匀的吸光物质的吸收池(或气体、固体)时,光的一部分被溶液吸收,一部分透过溶液,一部分被吸收池表面反射;
设:入射光强度为 Io,吸收光强度为Ia,透过光强度为It,反射光强度为Ir,则它们之间的关系应为:
  Io = Ia + It + Ir          (4)
若吸收池的质量和厚度都相同,则 Ir 基本不变,在具体测定操作时 Ir 的影响可互相抵消(与吸光物质的 c及 b 无关)
上式可简化为:           Io= Ia + It               (5)
实验证明:当一束强度为 I0 的单色光通过浓度为 c、液层厚度为 b 的溶液时,一部分光被溶液中的吸光物质吸收后透过光的强度为  It ,则  它们之间的关系为:
称为透光率,用 T % 表示。
称为吸光度,用 A 表示
则                A = -lgT = K · b ·c                      (7)
此即    Lambert-Beer  定律  数学表达式。
L-B 定律可表述为:当一束平行的单色光通过溶液时,溶液的吸光度(A) 与溶液的浓度(C) 和厚度(b) 的乘积成正比。它是分光光度法定量分析的依据。
二. 吸光度的加和性
设某一波长( l )的辐射通过几个相同厚度的不同溶液c1,c2...... cn,其透射光强度分别为 I1, I2 ...... In,根据吸光度定义:这一吸光体系的总吸光度为
而各溶液的吸光度分别为:
吸光度的和为:
即  几个(同厚度)溶液的吸光度等于各分层吸光度之和。
如果溶液中同时含有 n 中吸光物质,只要各组分之间无相互作用(不因共存而改变本身的吸光特性),则:
A = K1C1 b1 + K2C2 b2 + ⋯⋯  bn = A1 + A2+ ⋯⋯+ An     (10)
应用:①进行光度分析时,试剂或溶剂有吸收,则可由所测的总吸光度 A 中扣除,即以试剂或溶剂为空白的依据;
      ②测定多组分混合物;
      ③校正干扰。
三. 吸光系数
Lambert-Beer  定律中的比例系数“K ”的物理意义是:吸光物质在单位浓度、单位厚度时的吸光度。
一定条件(T、 l 及溶剂)下, K 是物质的特征常数,是定性的依据。
K 在标准曲线上为斜率,是定量的依据。常有两种表示方法:
1. 摩尔吸光系数(e):当 c用 mol/L 、b 用 cm 为单位时,用摩尔吸光系数 e  表示,单位为 L/mol·cm
                    A = e · b · c                        (11)
e 与 b及 c 无关。e 一