文档介绍：FSPYL030 饮料金黄色葡萄球菌的检验酶试验法
F_SPYL030
饮料—金黄色葡萄球菌的检验—酶试验法
1 范围
本方法适用于饮料中金黄色葡萄球菌的检验。
2 原理
饮料样品处理后,经增菌及分离,采用血浆凝固酶试验判定结果并计数。
3 试剂
胰酪胨大豆肉汤
成分
胰酪胨(或胰蛋白胨) 17g
植物蛋白胨(或大豆蛋白胨) 3g
氯化钠 100g
磷酸氢二钾
葡萄糖
蒸馏水 1000mL
制法
将上述成分混合,加热并轻轻搅拌至完全溶解,分装后,于 121℃下高压灭菌 15min,溶
液的最终 pH 为 ±。
%氯化钠肉汤
成分
蛋白胨 10g
牛肉膏 3g
氯化钠 75g
蒸馏水 1000mL
制法
将上述成分加热溶解,校正 pH 为 ,分装试管,于 121℃下高压灭菌 15min。
血琼脂平板
成分
pH ~ 豆粉琼脂 100mL
脱纤维羊血(或兔血) 5~10mL
制法
加热溶化琼脂,冷至 50℃,以灭菌手续加入脱纤维羊血,混匀,倾注平板。亦可分装灭
菌试管,置成斜面。亦可用其他营养丰富的基础培养基配制血琼脂。
Baird-Parker 琼脂平板
成分
胰蛋白胨 10g
牛肉膏 5g
酵母膏 1g
丙酮酸钠 10g
甘氨酸 12g
氯化锂(LiCl· 6H2O) 5g
琼脂 20g
蒸馏水 950mL
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增菌剂的配法
30%卵黄盐水 50mL 与除菌过滤的 1%亚碲酸钾溶液 10mL 混合,保存于冰箱内。
制法
将各成分加到蒸馏水中,加热煮沸至完全溶解。冷至 25℃,校正 pH 为 。分装每瓶
95mL,于 121℃下高压灭菌 15min。临用时加热溶化琼脂,冷至 50℃,每 95mL 加入预热至
50℃的卵黄亚碲酸钾增菌剂 5mL,混匀后倾注平板。培养基应是致密不透明的。使用前在冰
箱储存不得超过 48h。
肉浸液肉汤
成分
绞碎牛肉 500g
氯化钠 5g
蛋白胨 10g
磷酸氢二钾 2g
蒸馏水 1 000mL
制法
将绞碎之去筋膜无油脂牛肉 500g 加蒸馏水 1000mL,混合后放冰箱过夜,除去液面之浮
油,隔水煮沸半小时,使肉渣完全凝结成块,用绒布过滤,并挤压收集全部滤液,加水补足
原量。加入蛋白胨、氯化钠和磷酸盐,溶解后校正 pH 为 ~ 煮沸并过滤,分装烧瓶,
于 121℃下高压灭菌 30min。
灭菌盐水
兔血浆
成分
柠檬酸钠
蒸馏水 100mL
兔血全血
制法
取柠檬酸钠 ,加蒸馏水到 100mL,溶解后过滤,装瓶,121℃高压灭菌 15min。取
%柠檬酸钠溶液一份加兔全血四份,混好静置之,则血球下降,即可得血浆进行试验。
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