文档介绍：食品分析中的干扰消除
六.***的测定
这是食品分析的重要项目,对于保持食品的品质和存放均有意义。例如新鲜面包的水分含量若低于28%~30%,外观干瘪,失去光泽。
水分测定的主要方法有卡尔、费休(Karl Fischer,1935年提出)法、干燥法和各种仪器法。利用费休试剂(含I2、SO2、C6H5N及CH3OH的混合物,前三者之摩尔比为1:3:10)与水反应进行滴定,用目视或微安表指示终点,可用于低至10-6级水分的测定,各类样品均适用。操作的关键性因素是:
①充分脱水的无水甲醇、无水吡啶、干燥的SO2所组成的合乎要求的试剂;
②固体样品以40目为宜,粉碎样品时要防止水分损失并保证其含水量均匀;
③5A分子筛及无水硫酸钠的干燥性能有保证。
这是测定食品中游离脂肪及磷脂、色素、树脂、蜡状物、挥发油、糖脂等物总量(即粗脂肪)的主要方法,因为它们都易溶于无水***或石油醚等有机溶剂。容易引起干扰应予特别注意的主要因素有:
①样品应干燥后研细,样品含水分会影响溶剂抽提效果,并会使非脂成分溶出。
②装样品的滤纸筒一定要严密,不能外漏样品,也不要包得太紧影响溶剂渗透。放入滤纸筒时高度不要超过回流弯管,否则超过部分的样品中的脂肪不能提尽,造成误差。
③所用溶剂应无水、无醇、无过氧化物,挥发残渣含量低。因水和醇可导致水溶性物质溶解,使结果偏高。过氧化物会导致脂肪氧化。
④反复加热会因脂类氧化而增重。
还原糖包括葡萄糖、果糖,以及乳糖和麦芽糖。其他双糖(如蔗糖)、三糖乃至多糖(如糊精、淀粉),本身不具还原性,属于非还原性糖,但都可以水解生成相应的还原性糖。因此,还原糖的测定是一般糖类定量的基础。
直接滴定法是用还原糖样液,滴定热的酒石酸铜络合物,以次***蓝为指示剂。待二价铜全部还原为氧化亚铜沉淀后,稍过量的还原糖使次***蓝变成无色,即为滴定终点。
为消除干扰,通常:
①在酒石酸盐中加如少量亚铁***化钾,使之与Cu2O生成无色可溶性络合物,不再析出红色沉淀。
②滴定应在沸腾条件下进行以加速主反应,避免空气氧进入溶液使指示剂氧化而再变蓝和使亚铜氧化。
③滴定时不能随意摇动锥形瓶,更不能将其从热源上取走,否则空气氧进入而使结果偏高。
④进行样液预测,控制消耗该滴定液在10mL左右,以便正式测定时,预先加入比实际量少1mL左右的样液,在1分钟内完成续滴定,最大限度减少空气影响。
⑤测定时先将反应所需样液的大部分加入碱性酒石酸铜溶液中,与其共沸,仅留1mL滴入,旨在使绝大多数样液与反应液的作用条件相同,减少操作误差。
⑥影响结果的主要操作因素是反应液碱度、热源强度、煮沸时间和滴定速度。碱度越高,还原越快;沸腾时间短,消耗糖液多;滴定速度多快,消耗糖量多。测定时应严格控制上述条件(包括溶液蒸发速度),力求一致,。
测得的是总氮量,包括蛋白质、核酸、生物碱、卟啉、含氮类脂及色素等。1833年有Kieldahl首先提出,后屡经改进,其基本原理是将样品与浓硫酸和催化剂(硫酸铜等)一同加热消化,使蛋白质分解,其中的有机氮转化为氨与硫酸结合成硫酸铵;然后加碱蒸馏,使氨蒸出;用硼酸吸收后以标准溶液滴定。通过合适系数换算成蛋白质含量。干扰及其消除的关键在于:
①消解时不宜用强火,应保持微沸,以免粘附在凯氏瓶内壁上的样品分解使氮损失。
②消化过程中应注意不时转动凯氏烧瓶,以便利用冷凝酸液将瓶壁上的粘附残渣洗下,促其完全消化。
③样品中若含较多脂肪或糖时,消解过程中易产生大量泡沫,应在开始时小火加热,并时时摇动;或者加入少量辛醇、液体石蜡或硅油消泡。
④硼酸吸收液的温度不应超过40℃,否则吸收氨的作用减弱而造成损失,应用冷水冷却。
维生素分脂溶性(包括A、D、E、K各类)和水溶性(包括B、C各类)两大类,它们的共同点是异构体多。一般易氧化,在样品处理时需充分提取。
脂溶性维生素中,A和D均可用三氧化锑比色法测定。它们均主要存在于脂肪含量较高的油脂或动物性食品中,须先除去脂肪,常规的去脂方法是皂化,然后再经分离纯化后测定。干扰消除的关键操作是:
①皂化要完全。—5g经组织捣碎机捣碎后混匀,加入10mL1:1氢氧化钾及20—40mL乙醇,加热回流30分钟。加10mL水,稍稍振摇至混浊,否则须再加碱少量,继续皂化。
②用***提取皂化液时,易发生乳化现象,因而洗涤摇荡时不要用力过猛。必要时,加几滴乙醇破乳。
③所用的***仿中不应含水分,否则三***化锑水解生成沉淀,干扰比色。故在每毫升***仿中