文档介绍：青岛大学
硕士学位论文
小茴香粗提液对松材线虫的杀灭作用及其对松材线虫携带细菌
抑制作用的研究
姓名:郭延志
申请学位级别:硕士
专业:微生物学
指导教师:李荣贵
20120602
摘要关键词:小茴香,杀线活性,抑菌活性,菌种鉴定麦芽寡养单胞菌���������本文主要研究了小茴香粗提液对松材线虫的杀灭作用及对松材线虫携带细菌的抑制作用。小茴香乙醇提取物蒸干后蒸馏水溶解,经乙酸乙酯萃取后,得到的水相和乙酸乙酯相分别处理松材线虫,结果发现小茴香的杀线活性成分存在于水相中。通过比较小茴香乙醇提取物和蛋白质对松材线虫的杀灭作用,结果表明小茴香蛋白质没有杀线活性。利用水和不同比例的乙醇溶液分别浸取小茴香研磨物,发现纯水和纯乙醇的浸取液有很强的杀线活性。本实验得出小茴香乙醇粗提液在����、����、��陌胧�滤兰亮����直鹞�同时本文还对小茴香提取物对松材线虫携带细菌的抑菌性进行了研究。研究发现小茴香粗提液在浓度为�.���痬�跫�拢�运刹南叱嫘��南妇�薪虾玫囊�制作用,其抑菌效果为�.�ィ磺以诟门ǘ忍跫�履芄欢运刹南叱嫘��挠ü饧俚�胞菌��.�达到完全抑制的效果。根据菌落形态的特点筛选出三株对小茴香粗提液敏感菌株和一株不敏感菌株;根据����序列结合常规生理生化检验对分离菌种进行了鉴定。结果表明,三株敏感菌分别属于克雷伯氏菌属�������.�⑹�������、链霉菌属�������株非敏感菌属于成团泛菌�����������8醚芯拷�;肪秤押眯退晌�璨》�治药物的研究提供参考。�.�������/�,����/�,����/�,����/�,������/�。
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、盘多毛孢属�瞫砌删等⋯�多种真菌可以作为松材线虫的食言引松材线虫病�������琍���殖扑晌�璨。�且恢忠运珊痔炫5让浇槔�虫为传播途径,松树等树种为寄主,松材线虫为病原的森林疾病�縅。其发病迅速,死亡率极高,是世界各国高度重视的一种森林疾病。松材线虫最早发现于��年的日本,侵染范围很广,在亚洲、欧洲和美洲等国家和地区都存在该病所侵害的森林,其中以中国、韩国、日本受灾最为严重���近��昀矗�刹南叱娌≡斐傻乃鹗г嚼丛酱螅�殉晌J澜缢拇笊�植『χ�弧���各国科学家对松材线虫病展开了多方面的研究。松材线虫学名������������������������,是松材线虫病的病原。��年,日本学者清原友也、德重阳山将分离到的线虫接种至松树木质部,引起黑松和赤松树木大量死亡;多次实验结果确认了松材线虫的致病性【�。后面的研究发现松材线虫侵染松树后会引起松树的运输系统堵塞并改变有机物、矿质元素在寄主内的分布,破坏松树的光合作用【��。松材线虫的侵染会引起树脂道和木质部细胞死亡,���取���盟刹南叱娓叻肿恿看痔嵛锖褪惺鄣南宋�孛窸�����、果胶酶和��等细胞壁降解酶分别对�晟��年生赤松苗进行处理,结果发现线虫粗提物和细胞壁降解酶处理的松苗均出现松脂渗漏和水分疏导受阻的现象,这与染病松树的症状相似。松材线虫的伴生微生物主要包括伴生真菌和伴生细菌【.丌。伴生真菌主要的作用是在松材线虫的次生侵染过程中提供食物【�浚�芯糠⑾执缶サ闶���������、灰葡萄孢菌�����物。其中灰葡萄孢菌是松材线虫的最适食料,它能够生成��链己�.辛烯一�淮迹�俳�松材线虫生长和繁殖【��S醒芯勘砻魉刹南叱娴闹虏×�崴孀牌浞敝沉Φ脑銮慷�忧�松材线虫在侵染和侵染后,会为其携带细菌提供营养和保护,伴生细菌在产毒和促进线虫繁殖与辅助线虫进食等方面发挥重要作用�薄俊L镅┝恋取��通过����文库和宏基因组方法全面分析了不同地理种群松材线虫伴生细菌的多样性,发现伴生细菌主要由�����������、��湫尉������������变形菌�����������湍飧司��������。���自松材线虫分离到三种能够产生***的细菌:枯草芽孢杆菌����������、蜡状芽胞杆菌��������和巨大芽胞杆菌�����他的研究发现只是将细菌和经灭菌处理的无菌松材线虫分别接种赤松幼苗,实验对象均不发病,只有将细菌和无菌线虫混合接菌后