核酸检测技术 PPT课件.ppt

文档介绍：第2章
核酸检测技术
核酸检测技术
直接对动植物有害生物基因序列和结构进行测定。
核酸的分离纯化
PCR技术
核酸杂交技术
第1节
核酸的分离纯化
核酸的分离纯化的原则
保持核酸一级结构的完整性
提高核酸制品的纯度
技术路线的设计
破碎细胞的方法
机械(匀浆、超声破、研磨等)
非机械(化学处理、生化法)
沉淀是浓缩核酸最常用且高效的方法。
优点
缺点
乙醇
对盐类沉淀少,易挥发除去,不影响后续实验
需要量大,低温操作
异丙醇
需体积小,速度快,一般不需低温长时间放置
易使盐类、糖类与DNA共沉淀;异丙醇难以挥发除去
问题一:DNA样品不纯
抑制后续酶解和PCR反应
DNA提取常见问题
DNA提取常见问题
问题二: DNA降解