文档介绍：该【基因表达载体的构建课件 】是由【miao19720107】上传分享，文档一共【16】页，该文档可以免费在线阅读，需要了解更多关于【基因表达载体的构建课件 】的内容，可以使用淘豆网的站内搜索功能，选择自己适合的文档，以下文字是截取该文章内的部分文字，如需要获得完整电子版，请下载此文档到您的设备，方便您编辑和打印。基因工程的基本操作程序P8
剪切
拼接
导入
表达
基因工程的基本操作程序P8剪切 拼接 导入 表达
1
目的基因的获取 方法
目的基因的获取可以从自然界中已有的物种中分离出来，也可以用人工的方法合成。
目的基因的获取 方法目的基因的获取可以从自然界中已有的
2
使目的基因在受体细胞中 ，并且可以遗传给下一代
使目的基因能够________和 。
稳定存在
表达
发挥作用
3
启动子＋目的基因＋终止子＋标记基因＋复制原点
①启动子：一段特殊的DNA片段，位于目的基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，驱动基因转录。
②终止子：一段特殊的DNA片段，位于目的基因的尾端，使转录终止。
③标记基因：一般为抗生素抗性基因或荧光蛋白基因，鉴别受体细胞中是否导入目的基因。
＋目的基因＋终止子＋标记基因＋复
4
用产生互补末端的 酶分别切割载体和含有目的基因的DNA片段，再用 酶
把两者连接(如图)。
限制
DNA连接
5
单酶切(a酶）
①质粒重新环化
②质粒与目的基因反向连接
③目的基因自身环化
④产生质粒与质粒的连接产物以及目的基因与目的基因的连接产物。
的缺点
(a酶）①质粒重新环化的缺点
6
双酶切(a酶和b酶）优点
①防止质粒重新环化
②防止质粒与目的基因反向连接
③防目的基因自身环化
④避免质粒与质粒以及目的基因与目的基因的自身大量连接,提高正确连接的效率。
(a酶和b酶）优点①防止质粒
7
获取
目的基因
构建
表达载体
导入
受体细胞
目的基因检测鉴定
基因文库
基因组文库
cDNA文库
PCR
变性—复性—延伸
模板、引物、Taq酶、4种dNTP
人工合成
基因小
序列已知
获取构建导入目的基因检测鉴定基因文库基因组文库cDNA文库P
8
，正确的是（ ）
，其作用是筛选含有目的基因的受体细胞
C
，正确的是（ ）
10
，其中PstⅠ、SmaⅠ、EcoR Ⅰ、ApaⅠ为四种限制性核酸内切酶。下列说法错误的是 ( )
，表达载体中还应该含有启动子和终止子等结构
Ⅰ
D
12