文档介绍：药学专业毕业论文+任务书+开题报告+文献综述+外文翻译15
本科毕业论文设计手册
届
题目利用胡萝卜悬浮细胞表达aFGF的研究
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专业药学
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目录
中文摘要6
外文摘要7
引言8
1 实验材料与试剂8
11 实验材料及试剂8
com 植物材料8
com 菌株和质粒8
12主要试剂9
13 仪器9
2 实验方法10
21培养基的配制及培养条件10
com 有机母液配制10
comB培养基配置方法 11
com YEB培养基配置方法11
22目的基因的修饰与改造11
com 修饰改造过程中所需引物11
com反应体系11
com 第二轮反应体系11
com 第三轮反应体系12
23 pMHP0-FGF21载体的构建12
24 连接产物转化大肠杆菌感受态细胞12
25 质粒DNA提取13
26 无菌外植体的获得13
27 农杆菌介导法的遗传转化13
28 转化体的筛选鉴定14 3 结果14
31植物表达载体的构建14
32 胡萝卜悬浮细胞的转化及单克隆筛选15
33 抗性细胞单克隆培养16
34 阳性胡萝卜细胞的GUS检测16
35 aFGF蛋白检测17
4 讨论17
5 总结17
参考文献18
致谢aFGF的研究
摘要是一来源于中胚层及神经外胚层细胞有广泛促分裂作用为了降低aFGF的生产成本植物生物反应器的优点aFGF在中的表达进行了探索aFGF胡萝卜细胞表达aFGF克隆到胡萝卜通过检测及 Western blotting 检测aFGF胡萝卜悬浮细胞植物生物反应器
The study on aFGF expression using carrot
suspension cells
Abstract Derived from mesoderm and neural ectoderm cellsacid fibroblast growth factor aFGF has extensive mitogenic effects although it is very expensive In order to reduce the cost of production and to make full use of the merit s integrated with plant bioreator we have explored the aFGF in transgenic o expression This study constructed a aFGF expression vector in carrot cells useing plant transgenic technology The aFGF was cloned into the expression carrot suspension cells by the method of Agrobacterium inoculation The results of dot PCR and western blotting show that the desired fragment was essfully transferred into the plant cells and the protein was expressed in medium
Key WordsaFGF carrot suspension cell Plant bioreactor
引言
人酸性成纤维细胞生长因子acidic fibroblast growth factoraFGF是成纤维细胞生长因子家族的重要成员[1]人的aFGF基因位于第4号染色体上为单拷贝基因由两个大的内含子和3个外显子组成[2]aFGF主要分布于大脑它以自分泌或旁分泌的方式作用于周围细胞但其本身缺乏信号肽结构[3]aFGF蛋白由154个氨基酸残基组成等电点5-7通过与其受体结合启动信号转导机制从而诱导多种细胞分化增殖[4]aFGF在治疗帕金森综合症急性脊柱扭曲性损伤断指中神经功能重建脑缺血肾缺血心肌梗塞闭塞性脉管炎视网膜缺血胃溃疡及难愈合性伤口等多种临床应用方面具有巨大潜力[5]据统计我国仅烧伤年发生率为2即每年约有2200万人遭受不同程度烧伤其中约5烧伤病人需要住院治疗是不可忽略的社会问题同时难愈合溃疡如脉管炎引起的下肢溃烂糖尿病人的溃疡创面淋巴结核病人的溃疡创面各种术后感染的不愈合创面致使病人常年忍受精神上的痛苦和心理上的折磨据估计加拿大150万糖尿病患者中有15的病人将发生足部溃疡截肢术率高于85其原因是目前还没有特