文档介绍：现代免疫分析技术
---放射免疫与荧光免疫
免疫分析技术的发展
多元免疫技术
免疫沉淀
免疫凝集
补体结合反应
中和反应
免疫标记技术
经典免疫学方法
化学发光
胶体金
酶免疫
免疫荧光
放射免疫
PCR-免疫分析
时间分辨荧光分析
免疫标记技术=
抗原抗体反应
示踪物标记
灵敏度
特异性
免疫标记技术的主要特点:
高特异性、高灵敏度
免疫技术+标记技术
检测方法
检测范围
生化、常规免疫
mg~μg(10-3 ~10-6 g)
荧光免疫、酶免疫
μg~ng(10-6 ~10-9 g)
放射免疫、发光免疫
ng~pg(10-9 ~10-12 g)
PCR
pg~fg(10-12 ~10-15 g)
标记技术:将可被探测的示踪物质用化学方法与化合物连接。
免疫技术:以抗原-抗体反应原理为基础,对样品中相应抗原或抗体进行检测。
标记免疫分析:是利用多种标记技术与免疫技术相结合而建立的测定技术体系。其核心即是高灵敏性和高度特异性的有机结合。
标记免疫技术-基本概念
常见免疫标记技术
放射免疫技术
荧光免疫技术
酶免疫技术
放射免疫技术
1959年,美国,Yalow和Berson
测定血清胰岛素含量(标记抗原)
1977年获诺贝尔医学奖
放射免疫分析技术 (Radioimmunoassay,RIA)
优点:特异性强,灵敏度高,结果准确,检样用量少,结果重复性好,操作易自动化;
缺点:对抗体质量要求高,有放射性危害,检测仪器价格较高
放射免疫技术分类
(radioimmunoassay,RIA)
以标记抗原与反应系统中未标记抗原竞争结合特异性抗体来测定待检样品中抗原量。
(immunoradiometric assay,IRMA)
以过量标记抗体与抗原非竞争结合,采用固相免疫吸附载体分离游离和结合标记抗体。
:
放射受体分析(radioreceptor assay,RRA)
放射配体结合分析(radioligand binding assay,RBA)
Ag
Ab
*Ag
Ag-Ab
+
+
标记抗原(F)
特异性抗体
被检抗原
非标记抗原抗体复合物
标记抗原抗体复合物(B)
*Ag-Ab
limited,
competitive
放射免疫分析(RIA)技术原理