脂多糖对体外培养猪颗粒细胞增殖、凋亡和雌二醇分泌的影响.docx

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Dose-effectofLPSonGranulosacellsestradiolsecretionandP450aromgeneexpression3讨论在畜牧业生产中,各种原因造成的微生物过度繁殖,使大量LPS进入动物体内,导致多种疾病发生,严重损害动物的生产繁殖性能,带来不可估量的经济损失[20-21]。本研究根据LPS对颗粒细胞增殖及E2分泌的直接影响,通过不同的试验手段,发现LPS处理离体猪颗粒细胞后,一定程度地促进细胞增殖及抑制细胞凋亡。促进细胞增殖的基因FN1、IGF2、IGFBP2及促进细胞分裂周期的基因CyclinD1、CyclinD2的相对表达量呈现显著上调,抑制细胞周期的基因P27kip显著下调。以上基因的相对表达量变化说明添加LPS对细胞增殖及周期的基因表达产生影响,从而引起细胞的增殖及凋亡。有研究报道显示,LPS能够促进小胶质细胞[22]、卵巢细胞[23]、小肠上皮细胞[24]等多种细胞的增殖。也有试验表明,LPS能够促进小鼠的睾丸支持细胞增殖[25-26]。在本研究中,LPS能够显著地促进猪颗粒细胞的增殖,抑制细胞的凋亡,推测可能是LPS通过模式识别受体TLR-4途径[7,27]激活下游NF-κB通路导致的。有相关文献证实,LPS能够经由TLR-4途径促进大鼠血管平滑肌细胞[28]和肝癌细胞[29]等增殖。以及激活下游NF-κB通路导致细胞呈现增殖,这在Hela细胞研究中有所报道[30],NF-κB也直接参与调控细胞的增殖凋亡基因的表达等[31-32]。NF-κB通路能够促进一系列抗炎因子及肿瘤坏死因子的表达[16],其中,由TNFα介导的细胞凋亡途径被激活,而LPS能够通过激活NF-κB途径抑制TNFα导致的细胞凋亡现象[33-34],已经在肝细胞[35]、角质细胞[36]、内皮细胞[37]等多种细胞中被证实。K8和流式细胞仪的检测结果也证实LPS具有促进猪颗粒细胞增殖和抑制凋亡的作用,且与增殖及增殖周期相关基因相对表达量的结果相吻合。LPS在影响颗粒细胞的正常增殖凋亡程序时,也强烈地抑制颗粒细胞分泌E2的功能。P450arom由CyP19A1基因编码,是雄激素向雌激素转化的关键酶,在颗粒细胞分泌E2中起重要作用。本研究发现LPS能够直接抑制其基因表达,导致E2分泌减少。[14][15]等在牛颗粒细胞上得到的结果相似,证明LPS确实可以直接抑制颗粒细胞分泌E2的功能。而E2的正常分泌被抑制将导致动物生殖内分泌的紊乱,继发一系列不良反应。这一结果也解释了因疾病或因环境问题而引起的LPS感染所造成的安静发情、断续发情、卵泡发育受阻、排卵数下降、产后乏情、产仔数下降等现象。4结论LPS通过颗粒细胞的分子调控及基因表达影响其正常的增殖、凋亡,同时LPS可以直接抑制颗粒细胞分泌雌二醇。Reference(References):[1]李桂杰,朱瑞良,***的研究进展[J].山东农业大学学报,1999,30(2):93-,ZHURL,[J].JournalofShandongAgriculturalUniversity,1999,30(2):93-98.(inChinese)[2]郭萌,李冠民,***研究进展[J].中国实验动物学报,2009,17(5):397-,LIGM,[J].ActaLaboratoriumAnimalisScientiaSinica,2009,17(5):397-400.(inChinese)[3]MARCHESINIG,DENARDIR,GIANESELLAM,[J].BMCVetRes,2013,9:98.[4][J].ReprodFertilDev,2011,24(1):252-257.[5]江丹莉,张鑫杰,潘远基,、鹅血液内***含量、种鹅繁殖性能和雏鹅生长性能的影响[C].哈尔滨:第十四次全国家禽科学学术讨论会,2009:618-,ZHANGXJ,PANYJ,,thecontentofbloodendotoxin,thebreedingperformanceandthegrowthperformanceofgeese[C].Harbin:FourteenthNationalSymposiumonPoultryScience,2009:618-623.(inChinese)