文档介绍：样品��/�畉�,通过测试比较��逆┖推废堤匾煨孕蛄欣┰龅腃�转基因玉米��检测方法及质粒标准分子构建摘要为了保障我国乃至全球转基因产品标识管理制度的顺利实施,本文主要从两个方面开展了转基因产品检测技术的相关研究。转基因玉米��品系特异性检测方法的建立:基于转基因玉米��的��端旁侧序列设计了品系特异性的引物和探针,通过优化引物、探针等技术参数,建立了品系特异性定性、定量��觳夥椒ā2⒐菇�艘桓鍪视谧;�蛴�米��品系特异性单一和复合��ㄐ远�考觳獾闹柿1曜挤肿觩��。建立的单一和复合定性��觳夥椒ǖ募觳饬槊舳��均为��ィ�嗟庇��个拷贝玉米单倍体基因组��;�趐��建立的单一和复合荧光定量��扩增体系的标准曲线具有很高的反应效率和相关系数,重复性和重演性的标准偏差��值均小于��,绝对��蚅�均为�拷贝和�拷贝。同时,在实验室内部组织了�诵��笛槎怨菇ǖ谋曜挤肿觩��及其检测方法进行验证。结果显示,利用构建的标准分子及其检测方法获得实际样品定量检测结果与真实值偏差小于�%,相对标准偏差��敌∮��ィ�砻魉��建的标准分子及其品系特异性��觳夥椒ㄍ耆�视糜谧;�蛴衩��转基因玉米质粒标准物质研制:利用分子克隆手段,本文构建了适合于��废堤匾煨约觳獾闹柿7肿觩�、��、��。每个标准分子中均包含玉米内标准基因��序列和对应的外源品系特异性序列,并且在内标准基因和外源品系特异性序列问插入了一段��的特异性��斡糜诟春螾�检测。本文以质粒标准分子��@��了质粒标准物质适合性、均匀性、稳定性、定值和不确定度测定等技术方法和体系。在适合性测试中,��攵訲��米具有高特异性,��魑<�测对照,灵敏度低至为�个拷贝。在均匀性测试中,我们随机抽取了�份��测。转基因玉米��、��、值、平均拷贝数间的差异,及与总体平均值间的差异等,结果证明�个份样上海海洋大学硕士学位论文�
品间的差异无显著水平��.��T谖榷ㄐ圆馐灾校�直鹕瓒�嗽诓煌��温度和保存时间条件下处理��柿1曜挤肿樱�云鋤��推废堤匾煨孕蛄�扩增的�值和拷贝数分析结果显示:在室温��℃保存四周条件下,��柿��榷ǎ辉��嬷�嫠闹芴跫�拢琾�质粒��庞忻飨缘慕到馇魇啤T�定值和不确定度测试中,通过测序和荧光定量��姆椒ǚ治霰曜挤肿觩�插入的目标序列之比,利用方差分析估计这个比值的总体不确定度,最后验证得出所插入的��品系特异性序列与玉;米.��序列拷贝数之比为��关键词:标准分子,定性,定量,品系特异性,��,转基因玉米上海海洋大学硕士学位论文
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学位论文作者签名:泊娜日期:聊年乡月译上海海洋大学学位论文原创性声明果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明附件一本人郑重声明:所呈交的学位论文,是本人在导师的指导下,独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外,本论文不包含任何其他个人或集体己经发表或撰写过的作品成确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。
学位论文作者签名:沈燃指导教师一哦芗钼矽日日期&以夕年占月出归上海海洋大学学位论文版权使用授权书不保密晒。电子版,允许论文被查阅和借阅。本人授权上海海洋大学可以将保密口,在附件二本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定,同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。年解密后适用本授权书。本学位论文属于/�朐谝陨戏娇蚰诖颉�’’�
言引��转基因作物发展现状及其安全性问题近年来,随着基因工程技术越