文档介绍：基础理论 和技术的发展 催生了基因工程
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DNA重组技术的基本工具
是在生物体外,通过对DNA分子进行人工“剪切”和“拼接”,对生物的基因进行改造和重新组合,然后导入受体细胞内进行无性繁殖,使重组基因在受体细胞内表达,产生出人类所需要的新的生物类型和生物产品
分析概念:
工
具
为什么
要加工
什么是
表达
用什么
导入
基因操作的工具
基因的剪刀(分子手术刀)
——限制性核酸内切酶(限制酶)
基因的针线(分子缝合针)
——DNA连接酶
 基因的运输工具(分子运输车)
——运载体
到哪里去寻找这种酶
(1)限制酶
①分布:主要在原核生物中。
②作用特点:专一性,识别特定核苷酸序列,切割特定切点。
   ③结果:产生黏性未端和平末端
    ④举例:EcoR1限制酶、Sma1限制酶
与我们学过的
DNA酶相同吗?
识别序列的特点
作用是什么
两者的区别
这两种酶切的特点
切断的是什么键
限制酶的识别特点
以中轴线双侧的DNA上碱基呈反向对称,重复排列
如:GAA C GGG
CTT AAG C
(2)DNA连接酶
①连接的部位:磷酸和脱氧核糖之间的键:
磷酸二酯键(梯子的扶手)
②结果:两个相同的未端的连接。
③举例:E·coli DNA连接酶
T4 DNA连接酶
与DNA聚合酶
相同吗
二者在性质
上的区别
(3)运载体
①作用:将外源基因送入受体细胞。
②具备的条件:
能在宿主细胞内复制并稳定地保存。                具有多个限制酶切点。                具有某些标记基因
对受体细胞无害
③举例:质粒、噬菌体
和动植物病毒。
为什么
要具备
这些条件
基本操作程序
为什么要获得目的基因
为什么要把目的基因
与载体结合
受体细胞是指什么
为什么要进行检测
第一步:获取目的基因 方法:
。
基因文库的构建模式图
通过对
受体菌的
培养而
储存基因