文档介绍：人用狂犬病疫苗(地鼠肾细胞)RenyongKuangquanbingYimiao(DishushenXibao)ineForHumanUse(PHKCell)本品系用狂犬病病毒固定毒接种原代地鼠肾细胞,经培养、收获病毒液、灭活病毒、浓缩、纯化,加入适宜的稳定剂后制成,用于预防狂犬病。1基本要求生产和检定用设施、原材料及辅料、水、器具、动物等应符合“凡例”有关要求。。“生物制品生产和检定用动物细胞基质制备及检定规程”规定。~14日龄地鼠,无菌取肾,剪碎,经胰蛋白酶消化,分散细胞,接种培养瓶,用适宜的培养液进行培养。来源于同一批地鼠、同一容器消化制备的地鼠肾细胞为一个细胞消化批。源自同一批地鼠、于同一天制备的多个细胞消化批为一个细胞批。。“生物制品生产和检定用菌毒种管理规程”规定。原始种子批为2aG1,主种子批应不超过4aG。毒种在地鼠肾原代细胞和豚鼠脑内交替传代制备工作种子批,在地鼠肾原代细胞的传代应不超过第6代,即不超过10aG;在豚鼠脑内传代应不超过第5代,即10aG5。,-。。将毒种作10倍系列稀释,取适宜稀释度病毒液与等量狂犬病病毒特异性免疫血清混合,同时设立正常血清对照组,试验组与对照组的每个稀释度分别接种11-13g小鼠6只,,观察14天,中和指数应不低于500。,每个稀释度脑内接种体重为11-13g小鼠至少6只,,观察14天,。(附录XIIA),应符合规定。(附录XIIB),应符合规定。(附录XIIC),应符合规定。,腹腔注射体重为12-14g小鼠,。7天后重复接种1次作为试验组,未经免疫小鼠做对照组。第一次免疫后的第14天,试验组和对照组分别用10倍系列稀释的CVS病毒脑腔攻击,,每个稀释度10只小鼠。保护指数应不低于100。-60℃以下保存。。、MEM、199或其他适宜培养液。新生牛血清的质量应符合规定(附录XIIID)。(附录XIIC),应符合规定。,-(同一工作种子批应按同一MOI接种),置适宜温度下培养一定时间后,弃去培养液,用无菌PBS或其他适宜洗液冲洗去除牛血清,加入适量维持液,置33-35℃继续培养适当时间。,即为病毒单次