文档介绍：小麦种子蛋白质电泳法测定小麦种子纯度不受自然影响,测定结果较为准确对实现种子质量的前控将起到巨大作用,可将小麦假冒伪劣种子消灭在种植之前,以避免更大的经济损失小麦种子蛋白质电泳法测定纯度与田间小区种植鉴定结果一致,二者呈显著的正相关关系小麦醇溶蛋白是种子胚乳中的主要贮藏蛋白质,编码醇溶蛋白基因的6个位点(G1i-A1,G1i-B1,Gli-D1,G1i-A2,G1i-B2,Gli-D2)存在大量的等位基因变异。从电泳图谱上发现不同等位基因间的差异主要表现在蛋白谱带的数量、相对迁移率等方面。实验分组:8人为1组配试剂每人3个样品一、试验材料:绵麦37(省区试对照品种)二、药品器材Bio-RAD垂直电泳仪试剂配制样品提取Buffer(100ml):(每组20ml)***,2-***乙醇25ml10×电极buffer(1L):(每组100ml)冰醋酸40ml,甘氨酸4g,使用前稀释10倍凝胶buffer(1L):(每组200ml)冰醋酸20ml,甘氨酸1g。凝胶溶液(200ml):Acr=20g,Bis=,尿素12g,,,溶于凝胶buffer中。样品醇溶蛋白提取:取单粒种子,称重,用样品钳夹碎,,然后按1mg加5μl的比例加入样品提取液,室温浸提过夜,使用前用10000rpm离心10min。凝胶配制:取适量的凝胶溶液,加入适量的10%过硫酸***和TEMED,迅速摇匀,灌胶,插好样品梳,让其在5-10分钟内完全聚合。一般为每1ml凝胶溶液加入1µl的10%过硫酸***和TEMED。点样、电泳:小心拔出样品梳,用电极缓冲液冲洗加样孔,每个样品的上样量10µl。恒压500V,恒温10-15℃,电泳时间为***绿前沿指示剂迁移至板底所需时间的三倍。固定染色:每块胶板吸取1%考马斯亮蓝溶液5ml再加入10%三***乙酸200ml,染色过夜。漂洗:用清水漂洗胶,拍照,或制干胶保存。