文档介绍：+46紫外分光光度法测定维生素C片维生素C的含量一、实验目的学习利用紫外吸收光谱测定物质含量的原理和方法;熟练紫外-可见分光光度计的操作。二、实验原理维生素C(VC)是一种酸性己糖衍生物,具有烯醇式己糖内酯立体结构,分D和L两种立体构型,但只有L型有生理功效。维生素C具有较强的还原性,在一定条件下氧化型和还原型可以互变,两者均具有生物活性(结构式见图1),其C2和C3位上两个相邻的烯醇式羟基极易解离而释放出H,故维生素C虽然不含自由羧基,仍具有有机酸的性质。维生素C呈无色无臭的片状结晶体,易溶于水,不溶于脂。在酸性环境中稳定,遇空气中氧、热、光、碱性物质,特别是有氧化酶及痕量铜、铁等金属离子存在时可促进其破坏速度。具有π电子的共轭双键化合物、芳香烃化合物等,在紫外光谱区都有强烈吸收,其摩尔吸收系数k可达10-10数量级。利用紫外吸收光谱进行定量分析,要借助朗伯-比尔定律。根据维生素C在稀硫酸溶液(维生素C水溶液在pH5~6之间稳定)中,在245nm波长处有最大吸收的特性,建立了紫外分光光度法测定维生素C片含量的方法。三、实验仪器及试剂实验仪器:容量瓶(100ml、1000ml)、移液管(、5ml)、烧杯、紫外分光光度计实验用品:98%浓硫酸(分析纯,)、维生素C对照品系以原料药经105℃干燥至恒重(%)、维生素C片(2片)、去离子水-1-1-1-1-1-1-1-1-1四、·%浓硫酸放入事先已盛有蒸馏水的烧杯中,搅拌,冷却至室温后移入1000ml容量瓶,稀释至刻度,待用。·L-1对照品溶液的配制精密称取105℃干燥至恒重的维生素C对照品50mg置100ml量瓶中,··L对照品溶液。·、、、、,分别置100ml量瓶中,·L硫酸溶液稀释至刻度,摇匀,待用。·L硫酸溶液为空白,测定维生素C在稀硫酸溶液中最大吸收波长,并在此波长处测定维生素C对照品标准溶液的吸光度,以浓度对吸光度作线性回归。,精密称定,研细,精密称取适量(,约相当于维生素C50mg)置100ml容量瓶中,·L硫酸溶液适量,超声5min使溶解,·L硫酸溶液至刻度,摇匀,滤过,弃去初滤液,,·L硫酸溶液至刻度,摇匀,在最大吸收波长处测定吸光度。,精密称取辅料适量置100ml量瓶中,与步骤5样品含量测定同法操作,在最大吸收波长处测定吸收度为0。(C1),,于2ml已测得吸光度A1的样品溶液中,再测得吸光度A2(C2)。AbsAbs-1VC五、,结果显示VC在244nm波长处的吸光度值最大。.