文档介绍：胡寅等有机磷农药纳米磁珠酶联免疫分析方法研究
有机磷农药纳米磁珠酶联免疫分析方法研究
胡寅沈国清朱鸿林姜官鑫陆贻通
上海交通大学农业与生物学院,农业部都市农业南方开放重点实验室,上海
摘要将有机磷农药通用抗体固化在自行制备的纳米磁珠表面,以甲醇、***、及包被纳米磁珠的抗体稀释度为主要影响
因素,依据均匀设计法和间接竞争酶联免疫反应原理,对纳米磁珠酶联免疫分析方法进行了优化,并开展了纳米磁珠抗体
复合物对多种有机磷农药识别作用的比较研究。结果表明,无论是甲醇还是***,抗体稀释度与溶剂互作对半抑制浓度的影
响最大;与传统相比,纳米磁珠间接竞争对毒死蜱、喹硫磷、敌百虫、三唑磷、乙拌磷、伏杀磷、对硫磷、敌敌畏和久效
磷均有较好的识别作用,为.~./,比传统降低了. ~. ,灵敏度大大提高。
关键词酶联免疫分析纳米磁珠有机磷农药通用抗体
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有机磷农药是一类高效广谱杀虫剂,广泛应用米磁珠在细胞及生物大分子的分离与纯化等领域中
在农业和卫生害虫的防治上。由于其在环境中的残的研究引起了国内外的广泛关注。由于纳米磁珠
留风险,研究建立快速、高效的免疫检测技术一直是免疫检测方法的特异性高、操作简便快速,其在免疫
国内外的研究热点。其中,酶联免疫分析检测中具有巨大的应用前景口。笔者以有机磷农
在农药残留现场大样本快速筛选中占有独药为研究对象,开展了纳米磁珠制备及其方
特的优势。然而,传统追求抗原/抗体识法的研究。
别的高度特异性,通常一种抗体只能检测单种农药,
材料和方法
难以满足实际检测时一次测定多种农药同时检出的
需求。近年来,国内外相继报道了利用宽谱特异. 药剂和试剂
性抗体建立农药多残留检测方法。,但所毒死蜱、喹硫磷、敌百虫、三唑磷、乙拌磷、伏杀
报道的宽谱特异性抗体对不同农药的交叉反应率相磷、对硫磷、敌敌畏、久效磷、乙酰甲***磷、呋喃丹农
差太大,限制了其在多残留农药免疫分析中的应用。业部环境保护科研监测所标准品;酶标二抗山羊
其中,抗体性能以及实验条件的优化是重要的影响抗兔—;牛血清白蛋白、卵清蛋白;氨丙基
因素∞。三乙氧基硅烷、二***亚砜、
纳米磁珠免疫检测方法是近年来国内外研究的,一二***甲酰***、甲醇、无水乙醇、二***甲
一种新的免疫学技术,随着纳米技术的不断发展,纳烷、戊二醛等试剂均为分析纯。
第一作者:胡寅,男,年生,硕士研究生,主要从事免疫分析化学研究。通讯作者。
上海市科委科技攻关项目.、.;公益性行业农业科研专项.。
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环境污染与防治第卷第期年月
碳酸盐缓冲溶液:./,.。.. 纳米磁珠抗体复合物的制备
磷酸盐缓冲溶液:./,.。。纳米磁珠无水乙醇溶
洗涤液:含. 体积分数吐温一液,用清洗次,用磁分离器弃上清液。
的,.。加入体积分数戊二醛溶液,室温振荡交
底物溶液:取./、.的柠联,磁分离,弃上清液。用洗涤次并弃上
檬酸缓冲液,加入含./四***联清液后,
苯***的溶液和体积分氨基化。纳米磁珠