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甘肃荒漠地区野生白刺的组织培养.doc

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甘肃荒漠地区野生白刺的组织培养.doc

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甘肃荒漠地区野生白刺的组织培养.doc

文档介绍

文档介绍:甘肃荒漠地区野生白刺的组织培养
  摘要:以荒漠野生白刺作为试验材料,研究不同消毒方式对白刺茎段无菌外植体建立的影响及不同激素、不同浓度组合对野生白刺试管苗增殖和生根的影响。结果表明:选取室内种子萌发的实生苗茎段为外植体,用10% NaClO 消毒15~18 min可以获得理想的成活率;适宜的增殖培养基是MS+ mg/L 6-BA+ mg/L IBA或MS+ mg/L IBA;比较适宜的生根培养基是1/2 MS+ mg/L IBA。不添加激素的简化培养基MS0对白刺也有较为理想的增殖和生根效果。
  关键词:甘肃;荒漠地区;野生白刺;增殖;生根;组织培养
  中图分类号: : A文章编号:1002-1302(2015)09-0080-03
  收稿日期:2014-09-12
  基金项目:国家农村领域科技计划 (编号:2012BAD16B0303)。
  作者简介:张艳萍(1978―),女,甘肃武威人,助理研究员,主要从事分子生物学、病毒检测以及中药材组培研究。E-mail:******@。
  通信作者:董治宝。E-mail:******@。当前,全球盐碱地面积已达
[1], hm2,,,[2]。大面积盐碱地、荒漠地的开发利用对环境的改善具有重要的现实意义。白刺(Nitraria L.),灌木,蒺藜科,全世界有12个种,我国有 8个种,甘肃有5种 [3],其根系发达,具有很强的防风固沙、抗旱、抗盐碱、耐热、耐土壤瘠薄和耐沙埋能力,可明显改良土壤物理性状,提高土壤肥力[4]。此外,白刺根寄生的锁阳(Cynomorium songaricum Rupr)为传统名贵的温补药材[5],白刺果含多种营养成分和丰富的微量元素,具有极高的营养和药用价值[6]。近年来,从野生植物资源中寻找新的、潜在的药食同源植物,已成为国内外学者研究的热点,而沙生植物白刺则是经过长期的自然筛选而保留下来的优胜者之一,白刺因其顽强的生命力和优良的遗传基因而受到沙区人们的喜爱[7]。然而据调查,白刺种间杂交混乱,分化严重[8],同时随着自然环境的严重恶化和人为的大幅度破坏,白刺出现了不同程度的退化,大面积死亡或生长不良,结实率下降或不结实,使得这一特殊野生资源的种群繁衍面临着严重的威胁[9]。因此,为可持续利用这一野生资源,保持其优良性状的稳定性,采用离体繁育技术就成为重要途径之一。
  目前,较多学者对白刺进行过多方面的研究[10-14],其中关于白刺组培再生方面的研究已有不少
[15-18],发现不同品种的白刺分化增殖所需的激素种类差异很大。西伯利亚白刺和唐古特白刺需要6-BA和IBA的浓度与配比存在很大差异[16,19],添加一定量的IAA和GA更有利于天津野生白刺的增殖。可见,不同区域品种的基因型不同,所需激素不同,这是组培研究工作中普遍存在的问题[20-21]。本试验以甘肃荒漠野生白刺为材料,对其组培快繁进行研究,以期建立一套甘肃地区野生白刺较为简易的组培方法,为白刺的离体繁育提供参考。
  1材料与方法
  
  试验材料为荒漠野生白刺,采自甘肃省酒泉市巴丹吉林沙漠边缘,地理坐标为39°44′N、98°31′E,海拔1 000~1 500 m。于2012年7月和2013年4月先后2次采样,第1次于2012年7月下旬采摘的带果实枝条,冰盒内带回实验室,剪取顶端幼嫩枝条备用,同时采摘果实收集种子备用;第2次于2013年4月下旬,剪取当年旺盛新枝,冰盒内带回实验室备用。2次采样均为同株野生白刺枝条。
  实生苗获得:2013年2月,将收集的野生白刺种子种于温室花盆内,即可获得实生苗。
  
  ,流动自来水冲洗
30 min,放于超净工作台,用75%乙醇消毒30 s,%***化***处理4、6、8、10 min;取4月野外采集的茎段和种子发芽得到实生苗的茎段,流动自来水冲洗30 min,放于超净工作台,用75%乙醇消毒30 s,10%次***酸钠处理7、10、12、15、18 min。消毒剂处理完之后,用无菌水冲洗4~5次,接于MS培养基上,在温度(25±2) ℃、光照强度2 000 lx、光照周期16 h/d下培养1周,统计消毒率和无菌苗成活率。
  ,接种于添加不同激素浓度配比的MS培养基中,激素浓度水平和组