文档介绍：高中生物：基因工程
第1页，本讲稿共38页
基础理论 和技术的发展 催生了基因工程
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DNA单链
DNA单链 RNA – DNA杂交分子
RNA – DNA杂交分子 单链DNA
单链DNA 双链DNA
逆转录
使RNA降解
复制
核酸酶H
?
?
形成氢键
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第一步：获取目的基因 方法：
。
3. mRNA差异显示法获得目的基因 （反转录）
***段。
，如超声波把打成片段。
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原核生物基因表达的调 控
乳糖代谢基因表达调控图解：(有乳糖时)
Ｒ
Ｐ
Ｏ
lacZ
lacY
lacA
调节基 因
启动 子
操纵基 因
结构基 因
RNA聚合酶
信使 RNA
转 录
翻 译
阻抑物与乳糖结合后构象发生了改变，因而不能与 操纵基因结合，使得结构基因进行转录。
阻抑 物
乳糖
转 录
半乳糖苷酶
酶
酶
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第二步： 基因表达载体的构建
核心
目的基因与载体结合成为重组基因
需要
哪两种
工具
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总结：表达载体需由哪几部分组成
复制原点
启动子
目的基因
终止子
标记基因
它们的作用是？
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第三步：将目的基因导入受体细胞
将目的基因导入植物细胞
将目的基因导入动物细胞
将目的基因导入微生物细胞
什么叫转化
常用的转化方法有哪些？
具体过程？
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第四步：目的基因的检测与鉴定
首先：
其次：
最后：
还要：
检测与鉴定哪些环节
具体
方法？
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DNA分子杂交技术
基因探针：核酸分子探针是指特定的已知核酸片段，能与互补核酸序列退火杂交，用于对待测核酸样品中特定基因顺序的探测。
满足：（1）必须是单链，（2）带有容易被检测出来的标记物。
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编码区上游
编码区下游
RNA聚合
酶结合位点
RNA聚合
酶结合位点
编码
蛋白质
调控
调控
原核细胞
真核细胞
真核细胞
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1、3 基因工程的应用
转基因生物
目的基因
目的基因来源
抗虫植物
Bt毒蛋白基因
苏云金芽胞杆菌
（如：抗虫
蛋白酶抑制剂基因
植物
棉）
淀粉酶抑制剂基因
植物凝集素基因
抗病植物
病毒外壳蛋白基因
（如：转基
病毒的复制酶基因
因烟草）
几丁质酶基因
请继续把表格完成
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抗逆转基因植物
抗冻蛋白基因
鱼
抗除草剂基因
转基因玉米
富含赖氨酸的蛋白质编码基因
转基因延熟番茄
控制番茄果实成熟的基因
转基因矮牵牛
植物花青素代谢有关的基因
转基因鲤鱼
外源生长激素基因
人
转基因牛
肠乳糖酶基因
人
转基因牛（羊）
抗凝血酶基因、血清白蛋白基因、生长激素基因、a-抗胰蛋白酶
转基因烟草
发光基因
萤火虫
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工程菌
细胞因子、抗体、疫苗、激素、白细胞介素-2、干扰素、乙肝疫苗
基因治疗
腺苷酸脱氨酶基因
功能正常的基因
反义基因
***基因
器官移植的供体动物
被导入某种调节因子的器官供体基因组
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1、4蛋白质工程的崛起
蛋白质工程的概念
是研究蛋白质的结构及结构与功能的关系，然后人为地设计一个新蛋白质，并按这个设计的蛋白质结构去改变其基因结构，从而产生新的蛋白质。 或者从蛋白质结构与功能的关系出发，定向地改造天然蛋白质的结构，特别是对功能基因的修饰，也可以制造新型的蛋白质。
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一、蛋白质的改造
干扰素在体外保存困难
玉米中赖氨酸含量比较低
将分子中的一个半胱氨酸转变成丝氨酸
第104位的天冬