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菌种保管与转种传代检验标准操作规程.docx

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菌种保管与转种传代检验标准操作规程.docx

上传人:蓝天 2022/2/16 文件大小:86 KB

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菌种保管与转种传代检验标准操作规程.docx

文档介绍

文档介绍:菌种保管与转种传代检验标准操作规程
1目的
由于菌种是微生物实验室使用频率最高的对照物质,同时 它又是一活的微生物,容易发生变 异。为了保证所使用菌 种的稳定性,确保检测结果的准确性和可靠性,特制订本 标准操作规
氾。
2适用范围
菌种保管与转种传代检验标准操作规程
1目的
由于菌种是微生物实验室使用频率最高的对照物质,同时 它又是一活的微生物,容易发生变 异。为了保证所使用菌 种的稳定性,确保检测结果的准确性和可靠性,特制订本 标准操作规
氾。
2适用范围
适用于无菌检查法、微生物限度检查法、抗生素微生物效 价测定法、检验方法的验证、以及培养基灵敏度测试用菌 种的保存与管理。
3工作程序
1检验用标准菌株应来自中国药品生物制品检定所医学菌 种保藏中心。由中国药品生物制品检定所医学菌种保藏中 心分发的检定用标准菌种为冻干菌种,经开启接种至普通 琼脂斜面培养后,即作为工作中使用的菌种,称为工作用 菌种。
,接收菌种应检查安甑的数量和名 称,以及每一支安甑的完整性,并应在相应的菌种接收记 录上记上所有的关于菌种的信息,如名称、数量和接收日 期等,将安甑贮存于
-20° C直到需要时使用。一般安甑冻 干品可在5年之内使用。
3. 3原始菌种使用时首先需复活冻干菌种。应按菌种保藏中 心提供的相关资料的要求进行复溶、培养和保存。在此过 程中用显微镜进行生物学性状的确认鉴定。对己经过鉴定 的菌就可以进行菌种的传代和保藏了。
“甘油冷冻管保藏法或液体石蜡覆盖 保藏法”存储的菌种,进行复苏,直接作为工作用菌种。 工作用菌种也可置冰箱4〜8° C保存,每月用普通琼脂斜面 传代一次,将新传代的培养物替代原有的菌种,作为工作 用菌种。
3. 5传代时注意无菌操作,使菌株不死亡,不污染、不丢失。 同时实验人员也要采取有效的预防措施进行自我保护,如 工作时必须穿工作服,佩带无菌手套,实验完成以后消毒 实验进行的区域、实验仪器和器具。如发生意外,如菌种 泄漏或人员受伤,实验人员应立即向实验室主任报告以便 即使得以解决。
3. 6菌种的传代次数不得超过5代(冷冻干燥的原始菌种开 启后转种为第一代)。
3. 7凡培养好的菌种斜面,仔细观察有无染杂菌,可涂片镜 检,或再移种普通琼脂斜面在37° C培养48小时,检查有 无杂菌,如有可疑,即应废弃。
3. 8菌种设专人妥善保管,菌株保存箱加锁放置适宜环境, 取出时应登记。
9所保存的菌株建册登记,基本项目应包括菌种名称、菌 种系列号、传代次数、有效期、传代日期、保存方法、保 管者等。
一旦新一代菌种制备成功,务必要将上一代菌种处理 掉。处理过程应记录下来并存档。,不 能随意转让其他单位和个人,需要时应有单位证明和批准 手续方可供应。
4注意事项
1必须定期检查保藏菌种的暗室或冰箱的温度、湿度、以 及菌种管的棉塞是否松动或生霉,如有异常及时处理。
4-2每当移植大量菌种时,各菌的编号、批次及所用培养 基,须认真核对无误。
4. 3每次移植培养后,应与原种的编号、名称逐一核对,检 查培养特征无误时再继续保藏。
4-4凡用琼脂斜面保藏菌种时,须用连续三代的培养物作对 照检查。
4. 5保藏细菌的培养基应无糖,其他菌类含