文档介绍：环境雌激素环境雌激素的识别的识别
为了更全面更深入的研究内 EEs 并评价其对人类和和动动植物的危害,有必要对其进行检测
和和鉴别,探讨 EEs 与出生缺陷的因果联系,识别环境污染物中的 EEs 。
(一) 物理检测技术
物理检测一般是用色谱仪器(如液相色谱和和气相色谱)进行分析。色谱分析技术对含
EEs 样品品的前前处理过程要求较高,需要从复杂的基质样品品中将低浓度的目标化化合物高效提
取、纯化化和和浓缩。随着色谱检测技术与质谱检测技术的结合,检测分析的选择性和和灵敏度得
到到了很大的提高,检测范围进一步扩大。总之,做为色谱分析前前处理的萃取只能提取一类
或几类物理性质相似的 EEs ,而要完全分析样品品,必须采用不同的萃取、纯化化方法分别提取
与分析,因此耗时较长,费用也较大。
(二) 生物检测技术
生物检测是建立在 EEs 在体内的作用机制制及产生的生物效应的基础之上的。生物检测包包
括体内实验(In vivo test )与体外实验(In vitro test )。
1. 体内实验
体内实验主要包包括哺哺乳动动物实验、非哺哺乳类脊椎动动物实验(包包括鸟类实验、两柄类实验
和和鱼类实验等)、无脊椎动动物实验(包包括蚤类实验、糖虾繁殖实验等)(宋福永等,2004 )。
在动动物实验中,目前前所用的受试动动物主要为啮齿类动动物,如大鼠、小鼠等。方法有子宫增重
大实验、***细胞涂片实验、雌性动动物青春期实验、雄性动动物青春期实验、睾丸摘除实验、
两代繁殖实验等。
子宫增重大实验是检测雌激素活性的经典方法,选用未成年或成年后切除卵巢的雌性大
鼠或小鼠,连续皮下注射受试物或较长时间饲以含有受试物的食物,一段时间后处死动动物,
迅速剥剥离子宫,称取子宫的湿重和和(或)干重,计算子宫脏器系数,测定子宫过氧化化酶的活
力力,检测子宫血管渗透性等,用这些指标的变化化大小综合评定受试物的雌激素样活性与强度
(宋福永等,2004 ;王涛等,2004 )。
啮齿类动动物青春期实验分别以未成熟的雄性或雌性动动物暴露于 EEs ,通过检测雌性动动物
性器官和和第二性征的发育,来评价化化合物的雌激素活性。哺哺乳动动物两代繁殖实验则是研究化化
合物对哺哺乳动动物的剂剂量反应特性以及繁殖发育的负效应(宋福永等,2004 )。
***细胞涂片实验是以动动情周周期为 4天的大(小)鼠为试验对象,切除卵巢 12 周周内对其
进行染毒后观察***细胞的角化化情况(染毒后在 48 小时~72 小时内发生角化化)。该法特异性
较高,但与子宫增重法相比。灵敏度不高。对产卵脊椎动动物如鸟、鱼、爬行动动物和和两栖动动
物等。可通过检测动动物体内的卵黄蛋白素的合成来确定有无内分泌干扰活性。
2. 体外实验
体外实验主要有细胞培养实验、受体结合实验、体外芳香酶活性抑制制实验、分子生物学
检测技术等几种(宋福永等,2004 ;王涛等,2004 )。体外实验的设计主要根据 EEs 在体
内的作用机制制,如类雌激素在体内与 17β
雌二醇竞争结合雌激素受体。
细胞培养实验是利用细胞对雌激素或具有雌激素样作用的物质可产生特异性反应,通
过观察细胞生长曲线或测定特异性蛋白含量,来判断受试物的雌激素活性和和强度。用细胞培