文档介绍：人胚胎造血的AGM区基质细胞基因表达谱分析
作者:付劲蓉,陈惠芹,张绪超,黄绍良,周敦华,黄科
【摘要】 为了筛选在止主动脉-性腺-中肾区基质细胞中差异表达的基因,以氡药物流产的孕30-35天础的人胚胎AGM区来源基质浏细胞为“实验方”,以源自缨意外而致流产的孕4-5月岐的水囊引产的胎儿肝组织的乎基质细胞为“驱动方”,建卉立了在人AGM区基质细胞中差异表达基因的消减杂交欧文库。进一步用基因芯片技怒术对所建立的抑制消减杂交朽文库进行筛选,并挑选其中明显差异表达的18个克隆滇进行序列测定和同源性分析忙。结果表明:在所构建的A︼GM抑制消减杂交文库中,谕经过PCR鉴定有特异性扩增带且扩增带分子量在200-700bp的克隆有2搪11个,阳性率高达%。经醇过基因芯片筛选,挑选出r甭atio值大于5的克隆共18个进行序列测定显示,榕在测序的18个明显差异表溘达的阳性克隆中,4个为未晷知基因,14个为已知基因,其中这些已知基因分别参依与了细胞迁移、分化、生长拄、细胞周期、信号转导及血管发生等细胞重要生命过程分。这些基因大多数在胚胎分化造血发育中的作用尚未见丫报道。结论筛选AGM区基钟质细胞中差异表达的基因为茜进一步研究胚胎造血发育的分化调控的分子机理提供了
假必要的理论基础。
【关键帏词】 AGM区;胎肝;基质细胞;抑制消减杂交;基喽因芯片
Screeninegand Cloning象theGenesDiff详erentiallyEx激pressedinHum抑anEmbryonicA盼GM-DerivedSt酐romalCells
Abstract Tosc敛reenandseparLatethegenesd蟠ifferentiall熠yexpressedinhumanembryonicaorta-gonad-mesonephro鞅s(AGM)-deriv否edstromalcells,asubtract岁edlibrarywas诸generatedthr蹩oughthesupprбessionsubtra付ctivehybridiЭzationusingt碘hecDNA ofhum毋anembryonicA锰GM-derivedst彳romalcellsastargetandhum眦anfetalliver煎(FL)-derivedenahighthoug钣hscreeningte澳chnique,gene榷chip,wasused┽toscreenthed∩ifferentiall恚yexpressedge 211Clonesw谡ereselecteda共ndidentifiedfromtheestablishedsubtra得ctivelibrary锵,thepositive详ratiowasamouじntto%.18over莸-expressedge咸neswerescreenedbygenechi墒pwithmoretha砂na 5-folddif偷ferenceexpre痊ssionlevelsb嚷
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