文档介绍：动物细胞培养和核移植技术
第一课时
动物细胞工程常用的技术手段:
动物细胞培养、动物细胞核移植、
动物细胞融合、单克隆抗体
动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础。
提问:
植物细胞工程常用的技术手段有哪些?
植物组织培养, 植物体细胞杂交
从动物机体中取出相关组织,将它们分散成单个细胞,然后放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖。
一、动物细胞培养
1 、动物细胞培养的概念
动物组织块
细胞悬液
原代培养
传代培养
胰蛋白酶或胶原蛋白酶
处理分散成单个细胞
(幼龄动物的器官、组织或胚胎)
加入培养液
用胰蛋白酶等处理贴壁细胞,使细胞从瓶壁脱落
适宜条件

细胞
悬浮液
细胞贴满瓶壁
50代
细胞
原代
培养
传代
培养
⑴原代培养:
将动物组织经胰蛋白酶等处理后的初次培养。
⑵传代培养:
对贴满瓶壁的细胞用胰蛋白酶处理,然后再分瓶继续培养。
动物组织
单个细胞
细胞悬液
贴壁生长
分瓶培养
10代细胞
50代细胞
不死细胞
原代培养
传代培养
胰蛋白酶或胶原蛋白酶
剪碎
加培养液
接触抑制
少数癌变
少数
动物细胞培养技术流程
失去接触抑制现象
细胞核型不变
当贴壁细胞生长到表面相互接触时,细胞就会停止分裂增殖—细胞出现接触抑制。
哪些细胞失去了接触抑制?
传代培养时,少数超过50代的细胞,由于遗传物质发生改变,可无限增殖,并失去了接触抑制——肿瘤细胞。
⑶接触抑制
动物胚胎或幼龄动物的组织、器官
细胞悬浮液
胰蛋白酶
10代细胞
50代细胞
细胞株
无限传代(不死性)
细胞系
遗传物质改变
遗传物质未改变
4、动物细胞培养条件:
1、无菌、无毒的环境
(添加一定量的抗生素,定期更换培养液)
2、营养
(葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等。)
3、温度和PH
+(-), -
4、气体环境:
O2和CO2(95%空气和5% CO2 )
保证细胞顺利的生长增殖
维持培养液的PH
5、动物细胞培养应用
大规模培养生产生物制品(病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体)
作为基因工程中的受体细胞
培养的动物细胞可以用于检测有毒物质,判断某种物质的毒性
为治疗和预防癌症及其他疾病提供理论依据