基因工程操作步骤幻灯片.ppt

文档介绍：
二、基因表达载体的构建
三、将目的基因导入受体细胞
四、目的基因的检测与鉴定
一、目的基因的获取
一、目的基因的获取
1. 基因的结构



(1)原核生物基因结构
编码区
非编码区
非编码区
编码区上游
编码区下游
编码蛋白质
调控遗传信息的表达
(调控程序)
…A‥………ATGTGCACGTAGTTA………‥G……T‥………TACACGTGCATCAAT………‥C…
启动子
终止子
编码区
非编码区
非编码区
启动子
终止子
ATGTGCACGTAGTTA
TACACGTGCATCAAT
RNA聚合酶
AUGUGCACGUAGUUA
启动子:位于基因首端一段能与RNA聚合酶结合并能起始mRNA合成的序列。没有启动子,基因就不能转录。
RNA聚合酶:能够识别启动子上的结合位点并与其结合的一种蛋白质.
终止子:位于基因的尾端的一段特殊的DNA片断,它能阻碍RNA聚合酶的移动,并使其从DNA模板链上脱离下来,使转录终止。
编码区
非编码区
非编码区
(能编码蛋白质)
启动子
终止子
(2)真核与原核生物基因结构的比较
外显子
内含子
编码蛋白质
(不能编码蛋白质)
①相同点:都是由能够编码蛋白质的编码区和具有调控作用的非编码区。
②不同点:原核细胞基因的编码区是连续的;真核细胞的编码区是间隔的,不连续的。
真核生物基因结构

主要是指编码蛋白质基因,也可以是一些具有调控作用的因子。
例如:与生物抗逆性相关的基因,与生物优良品质相关的基因,药物和保健品相关的基因,与毒物降解相关的基因,以及与工业所需要酶相关的基因。
目前被广泛提取使用的目的基因有:苏云金杆菌抗虫基因、植物抗病基因(抗病毒、抗细菌)、人胰岛素基因等。

(3)用化学方法直接人工合成目的基因
(1)从基因库中获取目的基因
(2)应用PCR技术扩增目的基因
(1)从基因库中获取目的基因
①基因文库和部分基因文库的慨念
②基因组文库和cDNA文库的主要区别
③怎样从基因文库中找到我们所需要的目的基因
基因组文库的建立方法
提取某种生物的全部DNA
用适当的限制酶酶切
一定大小的DNA片段
将DNA片段与运载体连接
导入受体菌中储存(基因组文库)
目的基因
分离