1.1DNA重组技术的基本工具课件.ppt

文档介绍：基因工程的产物
G
A
A
T
T
C
G
A
T
T
A
C
DNA的二级结构
磷
酸
二
酯
键
氢键
限制性核酸内切酶作用的是DNA分子中的什么键?
磷酸二酯键
即脱氧核糖、磷酸之间的连接
A
T
G
G
C
A
T
C
T
T
C
G
A
A
G
P
A
P
G
C
T
T
A
A
G
C
T
T
A
A
EcoRⅠ
识别特定核苷酸序列
SmaⅠ
G
C
G
C
G
C
G
C
G
G
C
C
4 作用特点:
两侧双链DNA上碱基是
反向、对称、重复排列的。
中心轴线:
G
C
T
T
A
A
G
C
T
T
A
A
EcoRⅠ
SmaⅠ
G
C
G
C
G
C
G
C
G
G
C
C
4 作用特点:
识别特定核苷酸序列
,切断磷酸二酯键
粘性末端
平末端
粘性末端
如果把两种来源不同的DNA用同一种限制酶来切割,会怎样呢?
思考?
下列两个不同DNA序列都受EcoRI限制酶作用
TAA
GAAGTACTTAAGGGATT
CTTCATG TAA
GAAGTACTTAA GGGATT
CCGTAGAATTCGGA
T
CCGTAG AATTCGGA
GGCATCTTAA GCCT
类型
E·coliDNA连接酶
T4DNA连接酶
来源
功能
大肠杆菌
T4噬菌体
恢复
磷酸
二酯键
只能连接黏性末端
能连接黏性末端和平末端(效率较低)
相同点
差别
(二)“分子缝合针”——DNA连接酶
EcoRⅠ
黏性末端
黏性末端
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SmaⅠ
平末端平末端