文档介绍：乳糖酶基因的克隆及生物信息学分析
【摘要】目的:克隆并分析保加利亚德氏乳杆菌中的乳糖酶基因。方法:利用PCR技术从保加利亚德氏乳杆菌中克隆出乳糖酶基因、测序并生物信息学分析。结果:成功的从保加利亚德氏乳杆菌中克隆出全长为3 024 bp的乳糖酶基因,利用生物软件分析,推测乳糖酶基因共编码1 008个氨基酸,蛋白分子量为114 KDa,,氨基酸序列中共有9处潜在的糖基化位点。并将此基因与不同的乳糖酶基因进行同源性比较。结论:成功的克隆出乳糖酶基因,并利用生物分析软件对其进行生物信息学分析。了解该酶的性质特征,为进一步研究及低成本表达该酶奠定基础。
【关键词】乳糖酶基因;克隆;生物信息学分析
[ABSTRACT] Objective: To clone and analyze lactase gene from Lactobacillus delbrueckii bulgaricus. Methods: Cloned lactase gene from Lactobacillus delbrueckii bulgaricus ade sequencing and bioinformatics analysis. Results: Cloned lactase gene (3 024 bp) essfully. It ed that the lactase gene encode 1 008 amino acids, olecule 114 KDa, isoelectric point , 9 potential glycosylation sites in amino acid sequence. Made homology parison atics analysis is made by biological analysis softatics analysis
乳及乳制品含有丰富的优质蛋白质、脂肪、碳水化合物以及几乎全部已知的维生素和多种矿物质,还含有免疫球蛋白等抗病因子,易被人体消化吸收,是人类改善营养、增强体质的理想食品[1]。除此之外,在牛乳等制品当中还含有5%左右的乳糖,它是牛奶中主要的碳水化合物,对人体有着重要的作用。主要表现在于乳糖能促进钙质吸收及整理肠道的功效,特别是乳糖被分解后的半乳糖是婴儿脑发育的必需物质,与婴儿大脑的迅速成长有密切关系。然而,人体却不能直接利用乳糖,它必须被乳糖酶分解为单糖的葡萄糖及半乳糖后才能被吸收和利用。据研究发现,世界各国人口都有不同程度的乳糖酶缺乏,东方人乳糖酶缺乏高达85%[2],从而导致“乳糖不耐症”的发生。
乳糖酶(,又名β半乳糖苷酶)能将牛乳中的乳糖水解为葡萄糖和半乳糖,并具有半乳糖苷的转移作用[3]。利用该酶生产低乳糖制品或口服酶制剂,能够有效解决“乳糖不耐症”问题。乳糖酶广泛存在于扁桃、桃、杏、苹果和咖啡豆等植物中,大肠杆菌、乳酸杆菌、酵母菌和霉菌等微生物中,以及有效哺乳动物的小肠等器官和皮肤组织中。然而,不同的乳糖酶,其酶学性质相差很大。本研究从保加利亚德氏乳杆菌中成功的克隆出乳糖酶基因,并利用生物分析软件对其进行生物信息学分析。了解该酶的性质特征,为进一步研究及低成本表达该酶奠定基础。
1 材料与方法
材料
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