文档介绍：亲子鉴定的基本原理和方法
荣媛
whushine@
武汉大学中南医院
检验科&法医司法鉴定所
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亲子鉴定发展概况
不科学
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亲子鉴定与遗传标记
亲子鉴定:应用生物学技术方法来检测遗传标记,并依据遗传学理论进行分析,从而对被检者之间是否存在生物学亲缘关系所作的科学判定,实质是一种特殊的个体识别
◆血液细胞表面的标记
◆血液蛋白质的标记
蛋白质标记
DNA标记
限制性酶切片段多态性
DNA长度多态性(微卫星STR)
DNA序列多态性
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蛋白标记: 红细胞ABO,Ph,MN,Kell,Duffy,P等21个血型系统白细胞HLA-A,-B,-C,-D,-DP,-DQ,-DR
DNA标记:
RFLP,VNTR,STR ,SNP
蛋白标记:
血清型 Hp, Gc, Bf, Tf, C2,
酶型 PGM,EsD,ACP,GPT
遗传标记分类
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蛋白质遗传标记(血型检查)
由等位基因决定的红细胞表面抗原的差异,为最早用于亲子鉴定的遗传标记,有ABO、MN、P、Rh等21个血型系统。
特点:
遗传性状简单,符合孟德尔遗传规律
遗传多态性,不易受年龄、性别、疾病影响
操作简单、重复性好,结果明确
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ABO血型检查
人的ABO血型是受A,B,O三个复等位基因控制的,O为隐性基因,A、B为显性基因。
决定ABO血型的基因型AO,AA,BO,BB,OO,AB等6种,表现型有4种:A型、B型、 AB型和O型;根据孟德尔遗传规律,即可计算出孩子的可能血型的概率。
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DNA分子遗传标记的检测
DNA指纹技术(RFLP):第一代遗传标记
PCR分型技术:第二、三代遗传标记的检测(微卫星STR位点和单核苷酸多态性SNP)
线粒体DNA SNP
核内染色体 STR
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1985 英国 Jefferys Nature
人源小卫星 DNA 用作基因探针,同人体核 DNA 的酶切片段杂交,获得了由多个位点上的等位基因组成的长度不等的杂交带图纹,这种图纹极少有两个人完全相同,故称为"DNA指纹"
实验程序:基因组DNA的提取
限制性内切酶消化酶切
电泳分离
印迹转移
探针制备和标记
分子杂交和自显影
DNA指纹技术(RFLP)
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