文档介绍：白细胞分类计数(differention count of leukocyte)
实验二
谢海啸
1/3/2018
1
一、白细胞分类计数
白细胞分类计数是将血液制备成涂片,瑞氏染色后显微镜下根据白细胞的形态特征进行分类计数。通常分类100个白细胞,计算得出各种白细胞所占百分比。
1/3/2018
2
瑞氏染料溶于甲醇,离解为带正电的碱性美兰(M+)和带负电的酸性伊红(E-)离子。细胞的染色既有物理的吸附作用,又有化学的亲和作用。各种细胞成分的化学性质不同,对染料的亲和力也不一样,故可呈不同的着色特点。
瑞氏染色原理:
1/3/2018
3
血红蛋白、嗜酸性颗粒均为碱性物质,故与酸性染料伊红结合而染成红色,呈嗜酸性。
细胞核的核蛋白为酸性物质,故与碱性染料美兰结合,染成深蓝色或深紫红色,呈嗜碱性。
中性颗粒与美兰和伊红同时结合而染为淡紫红色,呈嗜中性。
染色原理:
1/3/2018
4
[器材]
光学显微镜
推片,载玻片
[试剂]
Wright染液
Wright
甲醇 600ml
磷酸盐缓冲液(~)
香柏油
[标本来源]
EDTA-K2抗凝全血
1/3/2018
5

1)准备:血膜干透后,用蜡笔在两端划线,以防止染色时染液外溢。将血涂片放染色架上。
2)加染液:在涂片上滴加瑞氏染液数滴,以染液覆盖整个血膜为度,稍静置1min。
3)加缓冲液:滴加缓冲液等量或多些,与上述染液充分混匀。
4)染色:染色10min.
5)冲洗:不要先倒掉染液,平持血涂片用流水缓缓冲洗干净。
6)干燥:直立血涂片,使其自然干燥。
1/3/2018
7
血涂片制作
1/3/2018
8
良好血涂片外观
-羽(子弹头)状尾部
-周边有空白
-无划痕
羽
状
尾
部
1/3/2018
9
不良血涂片
1/3/2018
10