文档介绍：该【2021年浙江大学830生物化学考研真题 】是由【青山代下】上传分享，文档一共【5】页，该文档可以免费在线阅读，需要了解更多关于【2021年浙江大学830生物化学考研真题 】的内容，可以使用淘豆网的站内搜索功能，选择自己适合的文档，以下文字是截取该文章内的部分文字，如需要获得完整电子版，请下载此文档到您的设备，方便您编辑和打印。:..专业代码:生物学(0710)考试科目:?写出化学式。胰凝乳蛋白酶57位氨基酸有什么作用?解析:氨基酸侧链PKr接近中性的是组氨酸(PKr=),胰凝乳蛋白酶57位氨基酸是组氨酸,与丝氨酸和天冬氨酸形成催化三联体,可以从丝氨酸接受质子,使丝氨酸羟基对底物进行亲核进攻。是胰凝乳蛋白酶活性部位的氨基酸。?体内有哪些类型并举例。解析:很多蛋白质含有除氨基酸外的其他化学成分作为其永久性结构的一部分,这样的蛋白质称为缀合蛋白质。糖蛋白如免疫球蛋白;脂蛋白如LDL、HDL;血红素蛋白如血红蛋白。?酶活力单位定义?有什么理化因素影响酶活力的测量?解析:酶活力是指酶催化一定化学反应的能力;其大小可用一定条件下催化某一化学反应的反应速率来表示。酶活力单位指一定条件下,一定时间内,将一定量底物转化为产物所需要的酶量。根据国际协定,对大多数酶来说,℃。影响酶活力的测量的理化因素:盐浓度,大多数酶不能耐受极高的盐浓度;温度,所有酶都在生物体特有的温度范围内起作用。温度升高通常会导致反应速率增加。较高的温度会导致反应速率急剧下降;pH,大多数酶对pH敏感并且具有特定的活性范围,都具有最适pH值;分子拥挤的效应:溶液中的大量大分子的拥挤程度将改变酶反应的速率和平衡常数。?各有什么类型?影响膜的流动性的因素有哪些?膜的流动性对生物功能有什么影响?解析:生物膜的组成成分主要是脂质和蛋白质,另有少量糖类通过共价键结合在脂质或蛋白质上。膜脂的种类有磷脂、糖脂和固醇;膜蛋白根据在膜上定位和跟膜脂结合的牢固程度可分为外周膜蛋白质、内在膜蛋白质和脂锚定膜蛋白兼在蛋白质。膜的流动性是指膜内部的脂和蛋白质分子的运动性。一般来说,脂肪链越短,不饱和度越高,膜脂的流动性越大。在动物细胞中,胆固醇对膜脂的流动性也起着重要的双向调节作用。温度对膜脂和膜蛋白的流动性也有影响。膜的流动性不仅是膜的基本特性之一,也是细胞进行生命活动的必要条件。,五种以上解析:ATP、NADPH、FAD、辅酶A、ADP-G:..***酸羧化酶,***酸脱氢酶系,谷丙转氨酶参与的化学反应式解析:①***酸羧化酶:***酸+CO+ATP+H2O→草酰乙酸+ADP+Pi2②***酸脱氢酶系:***酸+CoA-SH+NAD+→乙酰CoA+CO+NADH+H+2③谷丙转氨酶:谷氨酸+***酸=α-***戊二酸+,并说明调控机制解析:①糖异生反应:1,6-二磷酸果糖+H20→6-磷酸果糖+Pi。②调控机制:AMP对磷酸果糖激酶有激活作用AMP浓度高时,表明机体需要合成更多的ATP,AMP刺激磷酸果糖激酶使糖酵解过程加速,同时6-二磷酸果糖磷酸酶不再促进糖异生作用,ATP以及柠檬酸对磷酸果糖激酶起抑制作用,当二者的浓度升高时,磷酸果糖激酶受到抑制从而降低糖酵解作用,同时柠檬酸又刺激1,6-二磷酸果糖磷酸酶,通过它使糖异生作用加速进行。当饥饿时,机体血糖含量下降,刺激血液中的胰高血糖素水平升高。胰高血糖素有启动cAMP级联反应的作用,使二磷酸果糖磷酸酶-2和磷酸果糖激都发生磷酸化,结果导致二磷酸果糖磷酸酶-2受到激活,同时磷酸果糖激酶受到抑制。磷酸果糖激酶6-磷酸果糖转变为2,6-二磷酸果糖(F-2,6-BP)。2,6-二磷酸果糖是一个信号分子,它对磷酸果糖激酶和1,6-二磷酸果糖磷酸酶具有协同调控作用。2,6-二磷酸果糖对磷酸果糖激酶具有强烈的激活作用,而对1,6-二磷酸果糖磷酸酶有抑制作用;而2,6-二磷酸果糖磷酸酶使6-磷酸果糖水解形成6-磷酸果糖。因此可以理解2,6-二磷酸果糖的水平在饥饿情况下对调节糖酵解和糖异生作用有重要意义。在饱食的条件下,血糖浓度升高,血中胰岛素的水平也升高,这时2,6-二磷酸果糖的水平也随之升高。由于2,6-二磷酸果糖对磷酸果糖激酶的激活,和对1,6-二磷酸果糖磷酸酶的抑制,从而糖酵解过程加速,糖异生作用受到抑制,在饥饿时,低水平的2,6-二磷酸果糖使糖异生作用处于优势。-酶复合物(ES)对于反应有关键作用,为什么?有哪些作用力参与ES的形成?解析:底物S与酶结合形成中间产物ES,由于S与E的结合导致分子中某些化学键发生变化,呈不稳定状态,即活化态,使反应活化能降低。然后,复合物ES转变成酶与产物的复合物EP,继而EP裂解而释放出产物。这过程所需的活化能低,所以反应速率加快。酶与底物的作用力有氢键、疏水作用力、离子键、范德华力等。-PCR原理和过程。解析::..①原理:RT-PCR为逆转录PCR或者称反转录PCR,是聚合酶链式反应(PCR)-PCR中,一条RNA链被逆转录成为互补DNA,再以此为模板通过PCR进行DNA扩增。②过程:预变性,破坏DNA中可能存在的较难破坏的二级结构,使DNA充分变性,减少DNA复杂结构对扩增的影响,以利于引物更好的和模板结合,特别是对于基因组来源的DNA模板;模板DNA的变性:模板DNA经加热至93℃左右一定时间后,使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离,使之成为单链,以便它与引物结合,为下轮反应作准备;模板DNA与引物的退火(复性):模板DNA经加热变性成单链后,温度降至55℃左右,引物与模板DNA单链的互补序列配对结合;引物的延伸:DNA模板--引物结合物在TaqDNA聚合酶的作用下,以dNTP为反应原料,靶序列为模板,按碱基配对与半保留复制原理,合成一条新的与模板DNA链互补的半保留复制链,PCR仪扩增循环后72度延伸10分钟。:此系统的工作原理是crRNA通过碱基配对与tracrRNA结合形成tracrRNA/crRNA复合物,此复合物引导核酸酶Cas9蛋白在与crRNA配对的序列靶位点剪切双链RNA。而通过人工设计这两种RNA,可以改造形成具有引导作用的sgRNA,足以引导Cas9对DNA的定点切割。作为一种RNA导向的dsDNA结合蛋白,Cas9效应物核酸酶是已知的第一个统一因子(unifyingfactor),能够共定位RNA、DNA和蛋白,从而拥有巨大的改造潜力。将蛋白与无核酸酶的Cas9融合,并表达适当的sgRNA,可靶定任何dsDNA序列,而sgRNA的末端可连接到目标DNA,不影响Cas9的结合,可快速、准确对大小鼠及其他物种进行遗传改造。除了基因敲除,基因替换等基础编辑式,它还可以被用于基因激活,疾病模型构建。?真核生物转录起始复合物的组成和装配具体过程。解析:①基因转录是在RNA聚合酶的作用下,以双链DNA中的一条链作为转录的模板,按A-U和G-C配对的原则合成RNA的过程。②转录起始时,RNApol不直接结合模板的启动子,其起始过程比原核生物复杂。真核生物RNA聚合酶II必须与20个转录因子TFII逐级组装成“完全的转录起始复合体”才能启动转录过程。真核生物RNA聚合酶II在行使转录起始时,需要TFII先期识别或结合启动子,帮助RNA聚合酶II定位到DNA上的转录起始位点,并与RNA聚合酶II共同组装成转录起始的基本装置。:..解析:转基因技术的优点:解决粮食短缺问题;减少农药使用,避免环境污染;节省生产成本,降低食物售价;增加食物种类,提升食品品质;促进生产效率,带动相关产业发展。转基因技术的缺点:创造出的新型遗传基因和生物可能会危害到人类。它们可能会对生态环境造成新的污染,即所谓的遗传基因污染,而这种新的污染源很难被消除。还有转基因农作物和以此为原材料制造的转基因食品对人体的影响也尚未有定论。:①酵母双杂交:构建表达待检测蛋白与转录激活因子AD(转录激活结构域)或者BD结构域相融合的质粒,将两者同时转入酵母,通过检测下游报告基因的表达来判断蛋白质与目的DN***段的相互作用。②Co-IP:将靶蛋白的抗体连接到固体基质上,再将可能与靶蛋白发生相互作用的待筛选蛋白加入反应体系中,用低离心力沉淀或微膜过滤法在固体基质和抗体的共同作用下将蛋白复合物沉淀到试管的底部或微膜上。而后通过Westernblot、质谱等方法来检测沉淀复合物。③BiFC双分子荧光互补法:将荧光蛋白多肽链在某些不保守的氨基酸处切开,形成不发荧光的N-和C-末端2个多肽片段。将这2个荧光蛋白片段分别连接到1对待检测的目标蛋白上,在细胞内共表达或体外混合这2个融合蛋白时,由是否产生荧光来判断荧光蛋白分子是否重组成功,进而来判断蛋白之间是否具有相互作用。,验证两者相互作用的三种方法解析:①ChIP染色质免疫共沉淀技术:在活细胞状态下固定蛋白质-DNA复合物,并将其随机切断为一定长度范围内的染色质小片段,然后通过通过所要研究的目的蛋白质特异性抗体沉淀此复合体,特异性地富集目的蛋白结合的DN***段,通过对目的片断的纯化与检测,从而获得蛋白质与DNA相互作用的信息。②Gelshiftassay(电泳迁移率变动分析EMSA):将纯化的目标蛋白与同位素标记的DNA或RNA探针一同保温,而后在非变性的聚丙烯凝胶电泳中分离复合物,RNA/DNA复合物比没有结合蛋白质的探针迁移速度慢,进而来检测DNA/RNA探针与蛋白质的相互作用。③酵母单杂交:构建表达目的蛋白基因序列与转录激活因子AD(转录激活结构域)的融合蛋白的质粒,以及含有报告基因及融合了酵母GAL4启动子的待检测目标DNA序列的质粒,将两者同时转入酵母,通过检测报告基因的表达来判断蛋白质与目的DN***,说明基因文库和cDNA文库的差别:..解析:①基因组文库含有全部基因,cDNA文库只含有全部蛋白质编码的结构基因且受材料影响。②基因编码区外大量的调控序列信息,需要基因组文库。cDNA文库复杂性低、筛选简易。其克隆子数为基因组文库的十分之一③cDNA文库中,高丰度mRNA的cDNA克隆,所占比例较高,分离基因容易;低丰度mRNA的cDNA克隆,所占比例较低,分离基因困难。④cDNA文库假阳性概率低。基因组克隆子复杂,假阳性概率高。⑤真核生物克隆序列直接应用于基因工程,基因组文库不能。