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BAFF及其受体融合蛋白的构建表达纯化与功能鉴定的中期报告.docx

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BAFF及其受体融合蛋白的构建表达纯化与功能鉴定的中期报告.docx

上传人:niuww 2024/3/26 文件大小:10 KB

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文档介绍:该【BAFF及其受体融合蛋白的构建表达纯化与功能鉴定的中期报告 】是由【niuww】上传分享,文档一共【1】页,该文档可以免费在线阅读,需要了解更多关于【BAFF及其受体融合蛋白的构建表达纯化与功能鉴定的中期报告 】的内容,可以使用淘豆网的站内搜索功能,选择自己适合的文档,以下文字是截取该文章内的部分文字,如需要获得完整电子版,请下载此文档到您的设备,方便您编辑和打印。BAFF及其受体融合蛋白的构建表达纯化与功能鉴定的中期报告本研究旨在构建、表达纯化并进行功能鉴定BAFF及其受体融合蛋白。截至目前,已完成如下工作:(BAFF-R、TACI和BCMA)的融合蛋白表达质粒。将融合蛋白的序列设计并合成后,克隆到pET28a(+)载体中,得到BAFF-Fc/pET28a(+),BAFF-R-Fc/pET28a(+),TACI-Fc/pET28a(+)和BCMA-Fc/pET28a(+)构建表达质粒。(DE3)的转型和表达。将构建好的表达质粒转化进BL21(DE3)细胞中进行表达,同时控制感受态发酵过程中的菌体生长和表达质粒的转录表达。。收集到大肠杆菌经过超声、破细胞后的上清液,以蛋白A树脂为毛细管柱,对表达的融合蛋白进行纯化。-Fc/pET28a(+)、BAFF-R-Fc/pET28a(+)、TACI-Fc/pET28a(+)和BCMA-Fc/pET28a(+)进行了Westernblot检测。结果表明,检测出的蛋白质大约在70kDa左右,符合预期的分子量。。首先,将蛋白质进行定量,然后进行ELISA等生物学实验,利用分子生物学、生化学、免疫学等多方面的手段,探究融合蛋白的生物学功能。