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重组融合蛋白rMBP-NAP制备工艺研究的中期报告.docx

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重组融合蛋白rMBP-NAP制备工艺研究的中期报告.docx

上传人:niuww 2024/4/21 文件大小:10 KB

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重组融合蛋白rMBP-NAP制备工艺研究的中期报告.docx

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文档介绍:该【重组融合蛋白rMBP-NAP制备工艺研究的中期报告 】是由【niuww】上传分享,文档一共【2】页,该文档可以免费在线阅读,需要了解更多关于【重组融合蛋白rMBP-NAP制备工艺研究的中期报告 】的内容,可以使用淘豆网的站内搜索功能,选择自己适合的文档,以下文字是截取该文章内的部分文字,如需要获得完整电子版,请下载此文档到您的设备,方便您编辑和打印。重组融合蛋白rMBP-NAP制备工艺研究的中期报告一、研究背景重组蛋白是一种广泛用于生物技术和制药工业中的蛋白质,具有许多传统蛋白质所不具备的优点,如易于纯化和规模化生产等。重组蛋白的制备主要通过对目标蛋白基因进行克隆、表达、纯化等步骤来实现。其中,重组融合蛋白是一种常用的制备方法,其将目标蛋白与其他序列易于纯化的蛋白质进行融合,以提高目标蛋白的纯化效率。NAP(NucleosomeAssemblyProtein)是一种在真核生物中广泛存在的蛋白质,与染色质的结构和功能密切相关。NAP蛋白的研究有助于揭示染色质的组装机制和调控机制,对于深入理解生物基因表达和遗传调控机制具有重要意义。本项目旨在构建重组融合蛋白rMBP-NAP,并探究其制备工艺。二、-NAP蛋白表达载体将MBP(MaltoseBindingProtein)和NAP基因克隆到表达载体pET28a中,构建重组蛋白rMBP-NAP表达载体。-NAP融合蛋白利用大肠杆菌BL21(DE3)细胞表达rMBP-NAP融合蛋白,并利用Ni-NTA亲和层析纯化rMBP-NAP融合蛋白。-NAP融合蛋白纯化条件调节Ni-NTA层析柱洗脱缓冲液pH、NaCl浓度等因素,以提高rMBP-NAP融合蛋白的纯化效率和纯度。-NAP融合蛋白的生物学活性利用Westernblot等方法检测rMBP-NAP融合蛋白的生物学活性。三、-NAP表达载体,并进行了扩增和测序确认。(DE3)细胞表达rMBP-NAP融合蛋白,经SDS-PAGE表明表达在可溶性蛋白中。并通过Ni-NTA层析纯化获得了一定量的rMBP-NAP融合蛋白。-NTA层析柱洗脱条件的影响,探究优化工艺。同时,正在进行rMBP-NAP融合蛋白的纯度检测和比较分析。-NAP融合蛋白的生物学活性鉴定,预计下一步将利用Westernblot和其他方法进行验证。四、结论与展望本研究成功构建了rMBP-NAP表达载体,并经表达和纯化方法的初步探索,获得了一定量的rMBP-NAP融合蛋白。下一步将继续优化纯化条件,加强对蛋白的鉴定和活性测定,并进一步探究rMBP-NAP融合蛋白的生物学功能和应用前景。