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鲨鱼再生肝脏中TBC1D15基因的表达和蛋白结晶条件的筛选的中期报告.docx

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鲨鱼再生肝脏中TBC1D15基因的表达和蛋白结晶条件的筛选的中期报告.docx

上传人:niuww 2024/4/24 文件大小:10 KB

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文档介绍:该【鲨鱼再生肝脏中TBC1D15基因的表达和蛋白结晶条件的筛选的中期报告 】是由【niuww】上传分享,文档一共【2】页,该文档可以免费在线阅读,需要了解更多关于【鲨鱼再生肝脏中TBC1D15基因的表达和蛋白结晶条件的筛选的中期报告 】的内容,可以使用淘豆网的站内搜索功能,选择自己适合的文档,以下文字是截取该文章内的部分文字,如需要获得完整电子版,请下载此文档到您的设备,方便您编辑和打印。鲨鱼再生肝脏中TBC1D15基因的表达和蛋白结晶条件的筛选的中期报告一、研究背景TBC1D15基因编码一种Rab家族的GTP酶激活蛋白,已在多种物种中鉴定,是细胞膜运输和胞内信号传递的重要分子。早期研究发现TBC1D15在鲨鱼的再生肝脏中高度表达。近年来,基于生物工程的方法,已经成功地从鲨鱼脾中克隆和表达了TBC1D15,但是其结晶条件和空间结构信息仍未得到揭示。本研究旨在通过进一步筛选,提高鲨鱼再生肝脏中TBC1D15基因在大肠杆菌中表达的效率,探究其最佳表达条件,并进一步寻找TBC1D15的合适蛋白结晶条件。为获得TBC1D15的高分辨率晶体结构提供基础数据,为阐明其生物学功能奠定基础。二、,通过RT-PCR扩增TBC1D15基因。所选的引物序列如下:引物1:5'-ATGCAGAGGAGAGGAAGCTGTGTAAG-3'引物2:5'-AG-3',进行定向克隆到大肠杆菌表达载体pET-28a(+),将其转化到大肠杆菌膜中,经过IPTG诱导表达,采用SDS-PAGE检测表达蛋白质的大小和纯度。,发现TBC1D15表达量较低,且目前尚未获得其可行的结晶条件。下一步,我们计划对TBC1D15进行多角度的优化蛋白表达策略和结晶条件的筛选。同时,也会尝试利用一些基于分子异构策略、半人工晶体和点突变的方法,进行TBC1D15的结晶和解析。三、总结本研究在TBC1D15基因在鲨鱼再生肝脏中的表达和其蛋白结晶条件的筛选方面取得了初步进展,但也存在一些问题需要解决。我们将进一步进行优化以寻找最佳表达条件和蛋白结晶条件,为高分辨率的晶体结构解析奠定基础。