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文档介绍:该【基因表达分析技术 】是由【读书之乐】上传分享,文档一共【81】页,该文档可以免费在线阅读,需要了解更多关于【基因表达分析技术 】的内容,可以使用淘豆网的站内搜索功能,选择自己适合的文档,以下文字是截取该文章内的部分文字,如需要获得完整电子版,请下载此文档到您的设备,方便您编辑和打印。基因表达分析技术METHODSFORANALYZINGGENEEXPRESSION*基因表达分析技术*基因mRNA蛋白质多肽链基因表达*基因表达分析技术*一、通过检测mRNA揭示基因转录水平的表达特征根据分析方法的原理和功能特性,可将基因表达分析分为:封闭性系统研究方法:例如DNA微阵列、Northern印迹、实时RT-PCR等方法。只能研究已知的基因。开放性系统研究方法:如差异显示PCR、双向基因表达指纹图谱、分子索引法、随机引物PCR指纹分析等,可以发现和分析未知的基因。这里主要针对已知基因的常用表达分析方法做一介绍。*基因表达分析技术*(一)(Northernblot)※是一种基于RNA-DNA杂交原理建立的一种RNA分析技术※指将RNA变性及电泳分离后,并转移到固相支持物上,用杂交反应来鉴定其中特定mRNA分子的含量及其大小。*基因表达分析技术*三种印迹技术的比较*基因表达分析技术**基因表达分析技术*分子杂交实验*基因表达分析技术*放射自显影照片目录*基因表达分析技术*(ribonucleaseprotectionassay,RPA)是灵敏度和特异性很高的mRNA定量分析方法基本原理是将标记的特异RNA探针(32P或生物素)与待测的RNA样品液相杂交,标记的特异RNA探针与目的RNA结合,形成双链RNA,免受RNA酶的消化;而未结合的单链RNA经RNA酶A或RNA酶T1消化形成寡核糖核酸。*基因表达分析技术*RPA基本程序:●待测RNA的分离●体外转录标记RNA探针●待测RNA与探针RNA进行液相杂交●RNA酶消化●不同大小杂交片段凝胶电泳分离*基因表达分析技术*