文档介绍：一
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乳铁一蛋白测定方法的比较—
一,
卢蓉苍许时婴, 王璋
江南大学食品学院, 江苏无锡
摘要建立了种乳铁蛋白的测定方法并进行了比较。免疚酶联吸附法灵敏度高, 最小检测限低, 适合于乳铁蛋
白分离纯化的全程分析高效液相色谱法快速准确, 操作简便, 可实现乳铁蛋白初步分离时的同步分析分光光度法快
速简便, 准确性稍差, 适合于纯化后具有较高浓度的乳铁蛋白的在线分析。
关键词乳铁蛋白免疫酶联吸附法高效液相色谱法分光光度法
中图分类号文献标识码文童编号一一一
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免疫制得‘, 一“’色谱柱一一
引言
仪器
早在年, 人们在牛乳中发现了一种红色蛋白, 它就是酶联免疫检测仪南京华东电子管厂
乳铁蛋白, 以下简称川。经过多年的研究, 人们一型系统公司型紫外一可见光分
发现可增强铁的传递和吸收, 具有广谱的抑菌性等许多独光光度计上海仪器有限公司。
特的生理调节功能。可广泛应用于食品与医药行业”’。方法
建立准确、快速的含量的测定方法, 是进行分离、纯法参照文献【。
化、性质及功能研究的基础。本文建立了的免疫酶联吸附法法色谱条件一’
、高效液相色谱法、分光光度法等测定方法, 并流动相值为, 浓度为磷酸盐缓冲液
对这三种测定方法的准确性、相关性、适用范围进行了比较。含流速为柱温为℃进样
量为林检测器为检测器, 检测波长为。
材料与方法
波长扫描
材料将精制品溶液, 于一波长下扫描, 测定吸光
标样电泳纯, 纯度为公司粗制品度。
纯度为实验室自制精制品纯度为实验
, 结果与讨论
室自制鼠抗血清以标样作为抗原用鼠
法测定
收稿日期一一
,
一, , , , 血比配
作者简介卢蓉蓉女讲师在职博士研究生选择抗清工作浓度为制质量浓度为
, , 。
。林
从事乳品科学方面的研究的系列溶液测定值阴性对照根
, ☆
—
。, ,
据结果, 做出工作曲线见图。回归曲线的线性范围为验结果表明回收率在一之间在
。
此最小检测限为卜之间
表法回收率及精密度试验
火
一
期攀蹲以耐一工介恻定值妇妇纷犷均一回叼拿率啊一加
法与法的比较
。
· 灵敏度法的最小检测限低于法个数
质量浓度卜
量级, 灵敏度远高于法。
图法测定质且浓度的工作曲线准确性。法与法相比, 法的变异系
, 。
配制标样系列, 应用法测定, 每一浓度水平平行数较大相关性和准确性稍差这是因为法的线性范围为
一。, ,
测定次, 读取值后取平均, 用工作曲线计算测定值, 计算此儿在测定时对样品要进行多次稀释才能保证读
。,
回收率、标准偏差、变异系数见表。结果表明, 回取有效的吸光度值此外整个测定过程中试剂用量非常微量
,
收率在一之间, 在一之间。大多数低于卜因此操作过程中不可避免地会给测定带
来误差。这种误差可通过多次平行测定, 得到一定的弥补。
表法回收率及精密度试验,
法进样量虽然也是微量的林但可以做到准确
期馨峰户。一少今侧定值矛钊瘫味枣刘琴率矛咚一昌户〔之进样。质量型检测器可