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演讲人姓名
实验目的
掌握直接滴定法测定还原糖的原路及其方法
实验原理
试 样 经 除去蛋白质后,在加热条件下,以次甲基蓝作指示剂,滴定标定过的碱性酒石酸铜溶液(用还原糖标准溶液标定碱性酒石酸铜溶液),根据样品液消耗体积计算还原糖量。
试剂
盐酸
碱性酒石酸铜甲液:称取15 g硫酸铜(CUS04 . 5H20)及. 05 g次甲基蓝,溶于水中并稀释至1 000 mL.
碱性酒石酸铜乙液:称取50 g酒石酸钾钠、75 g氢氧化钠,溶于水中,再加人4 g亚铁氰化钾,完全溶解后,用水稀释至1 000 mL,贮存于橡胶塞玻璃瓶内
乙酸锌溶液: g 乙酸锌,加3m L冰乙酸,加水溶解并稀释至100m L
亚铁氰化钾溶液:称取10. 6 g亚铁氰化钾,加水溶解并稀释至100 mL,
葡萄糖标准溶液: 000 g 经过96℃士2℃干燥2h的纯葡萄糖,加水溶解后加人5m L盐酸,并以水稀释至1 000 ml。 mg葡萄糖
果糖标准溶液: 操作, m g的果糖。
乳糖标准溶液: 操作, m g的乳糖(含水)
转化糖标准溶液:准确称取1. 052 6 g纯蔗糖,用100 mL水溶解,置于具塞三角瓶中加5 ml盐酸(1+1)在68"C-70℃水浴中加热15 min,放置至室温定容至1 000 mL, mg转化糖
01
酸式滴定管:25 mL
02
可调电炉:带石棉板
仪器
分析步骤
1. 试样处理 汽水等含有二氧化碳的饮料:吸取100. 0 mL试样置于蒸发皿中,在水浴上除去二氧化碳后,移人250 mL容量瓶中,并用水洗涤蒸发皿,洗液并人容量瓶中,再加水至刻度,混匀后备用
:
吸取 5. 0m L乙液,置于150m L锥形瓶中,加水10m L,加人玻璃珠2粒,从滴定管滴加约9 mL葡萄糖或其他还原糖标准溶液,控制在2 min内加热至沸,趁热以每两秒1滴的速度继续滴加葡萄糖或其他还原糖标准溶液,直至溶液蓝色刚好褪去为终点,记录消耗葡萄糖或其他还原糖标准溶液的总体积,同时平行操作三份,取其平均值,计算每10 mL(甲、乙液各5 mL)碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖的质量或其他还原糖的质量(mg)[也可以按上述方法标定4 mL-20 mL碱性酒石酸铜溶液(甲乙液各半)来适应试样中还原糖的浓度变化」
吸 取 5. 0 m m L乙液,置于150m L锥形瓶中,加水10m L,加人玻璃珠2粒,控制在2 min内加热至沸,趁沸以先快后慢的速度,从滴定管中滴加试样溶液,并保持溶液沸腾状态,待溶液颜色变浅时,以每两秒1滴的速度滴定,直至溶液蓝色刚好褪去为终点,记录样液消耗体积
当样液中还原糖浓度过高时应适当稀释,再进行正式测定,使每次滴定消耗样液的体积控制在与标定碱性酒石酸铜溶液时所消耗的还原糖标准溶液的体积相近,约在10 mL左右。当浓度过低时则采取直接加人10 mL样品液,免去加水10 mL,再用还原糖标准溶液滴定至终点,记录消耗的体积与标定时消耗的还原糖标准溶液体积之差相当于10 mL样液中所含还原糖的量
01
吸 取 5. 0 M m L乙液,置于150m L锥形瓶中,加水10m l,加人玻璃珠2粒,从滴定管滴加比预测体积少1 mL的试样溶液至锥形瓶中,使在2 min内加热至沸,趁沸继续以每两秒1滴的速度滴定,直至蓝色刚好褪去为终点,记录样液消耗体积。同法平行操作三份,得出平均消耗体积
4 .试样溶液测定
02
计算结果
试样中还原糖的含量(以某种还原糖计)按式(1)进行计算
A
m X V/250 X 1 000
X 100
式中:
X— 试样中还原糖的含量(以某种还原糖计),单位为克每百克(g/100 g);
A 碱性酒石酸铜溶液(甲、乙液各半)相当于某种还原糖的质量,单位为毫克(mg) ;
m— 试样质量,单位为克(9);
V 测定时平均消耗试样溶液体积,单位为毫升(mL),
计算结果表示到小数点后一位。
数据处理
碱性酒石酸铜溶液的标定
项目/序号
1
2
3
V 葡萄糖
mL
V 葡萄糖
mL 平均
C葡萄糖
-1
Fmg
试样溶液测定
项目/序号
1
2
3
m试样g
V定容mL
250
V预测mL
V预mL
V测定 mL
V测定(平均)mL
X