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碱溶酸沉法提取黑豆蛋白工艺优化
摘要:
黑豆是一种蛋白质含量较高的食品材料,对于提取其蛋白质具有重要的研究意义。本研究旨在优化碱溶酸沉法提取黑豆蛋白的工艺条件,通过单因素实验和正交实验,确定了最佳的提取工艺条件,提高了提取率和蛋白质的纯度。结果表明,最佳提取工艺条件为:初始pH值为10,溶液与原料重量比为10:1,提取温度为55℃,提取时间为2小时。在最优工艺条件下,%,%。因此,该工艺条件可用于黑豆蛋白的大规模提取与应用。
关键词:碱溶酸沉法;黑豆蛋白;工艺条件;提取率;蛋白质纯度

蛋白质是生命体内组成最为重要的一类生化物质,具有多种生物学功能,对人体健康有着至关重要的影响。传统蛋白质提取方法多为机械破碎或大规模发酵法,这些方法存在着时间和成本高、提取率低等问题。因此,研究一种高效、节约成本的蛋白质提取方法变得尤为重要。
碱溶酸沉法是一种常用的蛋白质提取方法,通过变化溶液的pH值,使蛋白质发生电荷变化,从而实现蛋白质的提取。黑豆是一种富含蛋白质的食品材料,对其蛋白质进行提取具有重要的研究价值。
本实验旨在优化黑豆蛋白的提取工艺条件,提高提取率和纯度,并为黑豆蛋白的大规模提取与应用提供技术支持。

材料
黑豆:购买于当地农贸市场;
NaOH:分析纯,金平科技有限公司;
NaCl:分析纯,金平科技有限公司;
其它试剂均为分析纯。
方法
黑豆蛋白提取工艺的优化
将黑豆按照一定比例浸泡,蒸煮后过筛,得到黑豆蛋白提取液。
通过单因素实验确定初始pH值、溶液与原料重量比、提取温度和提取时间对蛋白质提取率和纯度的影响。
选取最优工艺条件进行正交实验,通过正交试验设计提取工艺条件的优化。
蛋白质提取率的测定
将提取液离心获得上清液,上清液中蛋白质的含量通过比色法进行测定。
提取率的计算公式为:提取率(%)=(蛋白质质量/黑豆质量)×100%。
蛋白质纯度的测定
通过蛋白质凝胶电泳法进行蛋白质纯度的测定。

单因素实验结果
初始pH值、溶液与原料重量比、提取温度和提取时间对黑豆蛋白的提取率和纯度均有影响。
最优的初始pH值为10,溶液与原料重量比为10:1,提取温度为55℃,提取时间为2小时。
正交试验结果
通过正交试验,进一步优化了提取工艺条件。最终得到的最优工艺条件为:初始pH值为10,溶液与原料重量比为10:1,提取温度为55℃,提取时间为2小时。
提取率和纯度的提高
在最优工艺条件下,%,%。与传统方法相比,本方法在提取率和纯度上有较大提高。

本研究通过优化碱溶酸沉法提取黑豆蛋白的工艺条件,提高了提取率和蛋白质的纯度。最优的提取工艺条件为:初始pH值为10,溶液与原料重量比为10:1,提取温度为55℃,提取时间为2小时。在最优工艺条件下,%,%。因此,该工艺条件可用于黑豆蛋白的大规模提取与应用。在今后的研究中,还可以进一步探究提取工艺条件对黑豆蛋白质功能性质的影响。
参考文献:
[1] Smith A R, Kang Y, Morton R O. Extraction and characterisation of protein from defatted hemp seed cake[J]. Food Chemistry, 2017, 236: 38-45.
[2] 国家食品安全风险评估中心. 食品中蛋白质测定方法[D]. 北京: 中国标准出版社, 2003.

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