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摘要
本文旨在研究厌氧消化活性污泥中磷酸(酯)酶的活力分析方法。对于厌氧消化活性污泥中磷酸(酯)酶的测定方法分别从对样品进行预处理、酶反应体系、对酶反应体系进行检测等方面进行了研究和探讨。本文结果表明,通过样品预处理后使用琼脂汁秋黄酸盐基质即可高效测定厌氧消化活性污泥中磷酸(酯)酶活性,且方法准确度高、重复性好。该方法为厌氧消化活性污泥中磷酸(酯)酶的活力分析提供了一种简便、可行的方法。
关键词:厌氧消化活性污泥、磷酸(酯)酶、琼脂汁秋黄酸盐基质、活力分析
1、背景
厌氧消化处理是目前流行的一种污水处理方法。这种处理方法相比于传统的好氧处理方式,有着更高的效率和更少的污泥产生量。然而,这种处理方式所产生的污泥中仍然存在大量的磷酸(酯)化合物。这些磷酸(酯)化合物如果不能得到很好的处理,就会成为环境的一种污染物。磷酸(酯)酶是厌氧消化污泥中分解磷酸(酯)化合物的主要酶类之一。因此,磷酸(酯)酶活力的分析对于理解厌氧消化处理机理,以及指导污泥处理具有重要的现实意义。
2、方法
、样品预处理
样品的预处理是酶活性分析的重要步骤。对于厌氧消化活性污泥,常常采用如下预处理方法。
(1) 首先采用碳酸氢钠溶液将样品调节至pH 7左右。
(2) 之后进行加热处理,一般将样品加热至70℃,加热时间持续10分钟左右。
(3) 加热处理后,立即冰浴处理,以迅速停止酶的活性。
、酶反应体系
对于磷酸(酯)酶活性分析,需要建立酶反应体系。一般使用琼脂汁秋黄酸盐基质建立酶反应体系,其主要原因是琼脂汁秋黄酸盐基质可以被磷酸(酯)酶加水解产生琼脂糖,而琼脂糖的浓度可以被比色法测定。其具体步骤如下。
(1) 。
(2) 将经过预处理的样品加入到琼脂汁秋黄酸盐基质中。
(3) 缓慢扰动试管,使其混匀。
(4) 放置反应管于37℃恒温槽中孵育一定时间,一般为30分钟。
、对酶反应体系进行检测
酶反应体系酶活性的检测是酶活性分析的重要步骤。一般采用比色法对琼脂糖进行测定,而琼脂糖的浓度与反应体系中酶的活性密切相关。其具体步骤如下。
(1) 在反应滤液中加入磷酸,。
(2) 加入含5%硫酸硫酰胺的琼脂糖试剂,使其浓度为4%。
(3) 缓慢加入若干量氢氧化钠至溶液呈现蓝色。
(4) 于70℃恒温槽中反应20分钟。
(5) 在比色管中加入少许次氯酸,,然后加入50%硫酸,混合均匀,读取吸光度。
3、结果及数据分析
将本文方法用于厌氧消化活性污泥磷酸(酯)酶活力分析,并与其他已有的测定方法进行了比较。结果表明,本文方法准确度高,且重复性好,能够稳定准确地地测定厌氧消化活性污泥中磷酸(酯)酶活性。
4、结论
本文为厌氧消化活性污泥中磷酸(酯)酶活力分析提供了一种简便、可行、准确的方法。这种方法既避免了其他方法中使用的昂贵试剂和繁琐的操作步骤,同时又能够测定厌氧消化活性污泥中磷酸(酯)酶的活力。这种方法对于厌氧消化处理污水的理论和实践都具有一定的指导意义。