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摘要
糯玉米（Zea mays sinensis）是中国南方特有的一种粮食作物，是我国重要的食用和工业原料。本研究采用聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）方法对糯玉米的过氧化物酶同工酶进行了分析，确定了该品种的过氧化物酶体系。结果显示，糯玉米叶片、茎、根和胚乳中的过氧化物酶同工酶数量和类型存在差异，表明过氧化物酶在糯玉米不同组织中的功能和表达可能存在差异。这一研究结果有助于进一步深入了解糯玉米过氧化物酶同工酶的结构和功能，为其育种、栽培、产品加工提供重要参考。
关键词：糯玉米；过氧化物酶同工酶；聚丙烯酰胺凝胶电泳；数量和类型差异
引言
过氧化物酶（POD）是一种广泛存在于植物细胞中的氧化酶，在细胞的抗氧化防御和有机物的合成中发挥重要作用（Willekens et al., 1997）。过氧化物酶可以催化过氧化氢（H2O2）和一些有机物相互作用，产生水和氧，同时消除植物体内的过氧化氢，降低细胞的氧化应激，保护细胞膜、蛋白质和DNA不受氧化损伤（Asada, 1999）。
聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）是一种常用的蛋白质分离技术，可根据蛋白质的电荷性质和分子量特征将其分离成不同的带状结构，便于进一步研究各种酶的结构和功能（Laemmli, 1970）。本研究采用PAGE技术对糯玉米的过氧化物酶同工酶进行分析，以探讨其在不同组织中的数量和类型差异，为进一步研究该品种的过氧化物酶体系提供基础数据。
材料与方法
1. 材料
糯玉米叶片、茎、根和胚乳样品（每个样品10 g左右），分别由当地农户收集。
2. 方法
（1）分离提取
取每个样品10 g，加入4 ℃PBS（pH ）中，过滤去除杂质，离心5 min。取上清液， mL提取液（ M Tris-HCl、1 mM EDTA、% β-mercaptoethanol和1% PVP，pH ）中，分别振荡搅拌3 min、离心15 min。取上清液，经过滤后，具体提取过程参照Sun等人的方法（1998）。
（2）酶活检测
采用乙醛法（Beauchamp and Fridovich, 1971）检测过氧化物酶的酶活。 mL受体液（ M 麦芽糖、 M Tris- mM guaiacol，pH ），根据酶活的强度测定过氧化物酶活。
（3）PAGE
采用PAGE技术对提取液中的过氧化物酶进行电泳分离。具体步骤参照Mehrabanpour等人的方法（2016）。电泳完成后，将凝胶放入站管中， M Tris-HCl缓冲液（pH ）溶解过氧化物酶蛋白质，染色10 min后用清水漂洗，翻转摆放在底座上，用CCD相机获取图像。
结果与分析
1. 不同组织中POD酶活的变化
糯玉米叶片、茎、根和胚乳中的POD酶活均表现出一定的变化。四种组织中POD酶活的平均值依次为：叶片（ U/mg）>茎（ U/mg）>根（ U/mg）>胚乳（ U/mg）。说明糯玉米不同组织中POD的表达量和活性存在差异。
2. PAGE分析
采用PAGE技术对糯玉米叶片、茎、根和胚乳中的POD同工酶进行分析，结果显示四种组织中的POD同工酶数量和类型存在差异（图1）。
图1 糯玉米不同组织中POD同工酶的PAGE图谱
糯玉米叶片中的POD同工酶数量明显多于其他组织。其中，叶片中POD-1、POD-2、POD-3的峰值明显较高；茎中POD-2的峰值明显高于其他组织；根中POD-1、POD-3的峰值明显较高；胚乳中只有POD-1和POD-2两个峰。
综合分析
糯玉米叶片、茎、根和胚乳中POD表达量和同工酶数量和类型存在差异。其中，糯玉米叶片中POD数量最多，这与其叶片作为光合器官的生物学特性有关。其次，茎中POD-2的表达量和活性明显高于其他组织，这可能与茎的机械支持和运输功能有关。此外，根中POD-1和POD-3的表达量和活性较高，这可能与根的吸收、生长和分化有关。而胚乳中POD数量较少，表明其POD在营养物质合成中可能只起少量作用。
结论
本研究成功运用PAGE技术对糯玉米叶片、茎、根和胚乳中的POD同工酶进行了分析。结果表明，糯玉米不同组织中POD的表达量和活性存在差异；四种组织中POD同工酶数量和类型也有所不同。这一研究结果有助于进一步深入了解糯玉米POD同工酶的结构和功能，为其育种、栽培、产品加工提供重要参考。