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第二节 组织培养中的无菌技术
第三节 培养基及其配制
第四节 组织培养的基本程序
第五节 外植体的褐变与玻璃化苗
第三章 植物组织培养常规技术
第一节 组织培养所需要的基本条件
CONTENTS
仪器设备
01
无菌条件
02
实验室设置
所需条件
03
实验室的设计和装备程度应依据工作目的、规模以及实际的经济状况而定。
化学实验室
无菌操作室
培养室
观察鉴定室
驯化移植室
（一）化学实验室
化学实验室是进行预处理和前期准备的场所
器皿、用具的洗涤、干燥、灭菌和保存
培养基配制
植物材料的清洗和预处理
存放各种器皿、设备和药品等
用途:
化学实验室应有实验台、药品柜、防尘橱或防尘柜
冰箱、烘箱、天平、酸度计、水浴锅、电炉、灭菌锅、蒸馏水器等设备也可存放于该室的不同位置，相应的操作也在该室中进行。
需要的装备:
干净明亮，气流畅通。
要求
用途：无菌操作室也称无菌室或接种室，它是组织培养中进行无菌操作的场所 。
设备：超净工作台 、灭菌器等。
要求：
一般要求室内干爽、整洁、明亮，墙壁光滑平整不易积染灰尘，地面平坦无缝便于清洗和消毒。
室内应尽量少放设备和器械，除在出入口安装移动滑门外，其他门窗均应密闭，以保证没有通风和空气对流，通风换气必须通过空气调节装置进行。
定期用甲醛和高锰酸钾或其他药剂进行消毒灭菌，室内的上方和门口也应安装紫外灯，使室内保持良好的无菌或少菌状态。
无菌室外应设缓冲室
用途：培养室是培养接种材料的场所。
设备：摇床、光照培养箱、培养架、空调、加湿除湿设备、时间程控器械。
要求：
优越的照明条件：日光灯
良好的温控条件：自动控温电炉或空调等
能够保持一定的湿度：除湿机、加湿机（器）
能进行通风换气。通风窗口或加装排风扇
环境条件的控制与要求
用途:对培养物进行观察鉴定的场所。
设备:
显微观察设备:双筒实体显微镜、高倍显微镜、倒置显微镜及其相应的显微照相设备、离心机、测微尺和血球计数器等 。
组织切片染色设备:普通和超薄切片机、磨刀机、烤片台或烘片器、恒温箱、染色缸等 。
照相冲洗设备等 :照相机、近视镜、测光表、显影罐、放大机、暗袋或暗箱等 。
（五）驯化移植室
用途：主要用于试管苗的驯化和移栽；也可用于母株的预栽培。
01
设施：室内应备有弥雾装置、荫棚、移植床（苗床）、恒温恒湿控制仪、光照调节装置等设施以及培养土、培养盆（钵）、育苗盘等器材。
02
驯化移植室1、2
03
二、常用仪器设备与器械
超净工作台 ；高压蒸汽灭菌锅 ；冰箱 ；烘箱 ；天平 ；蒸馏水器 ；酸度计 ；摇床与转床 ；光照培养箱
常用仪器设备：
培养器皿 (图2)
盛装器皿
计量器皿
灭菌器械
接种器械
其他 ：漏斗、玻璃棒、落水架、器械支架、洗瓶、毛刷等。
常用器皿与器械