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细胞因子与细胞粘附因子的测定
是由活化的免疫细胞及某些基质细胞表达并分泌的活性物质，其主要生物学功能是介导和调节免疫应答及炎症反应，其化学本质是蛋白质或多肽。
细胞因子
细胞粘附因子
是介导细胞间及细胞与细胞外基质间粘附作用的分子，其化学本质为糖蛋白，可以细胞膜表面表达和可溶性两种形式存在。
第一节 生物学测定方法
：
DNA扩增法
RNA印迹法
原位杂交法
核酸酶保护分析
生物学测定法分类
根据细胞因子特定的生物学活性,应用相应的指示系统,同时与标准品对比测定,从而得知样品中细胞因子的活性水平,一般以活性单位(U/ml)表示
生物活性测定法原理
有 助 于 细 胞 因 子 检 测
的 活 性 作 用 包 括
有助于细胞因子检测的活性作用
刺激细胞增殖或集落形成的活性维持细胞生长和存活的特性
抑制细胞生长或破坏细胞的效应促进细胞趋化或抗病毒作用
敏感性较高
特异性不高
操作繁琐
易受干扰
五、生物学活性测定方法学评价
第二节 免疫学测定法
细胞因子(或受体)与相应的特异性抗体( 单克隆抗体或多克隆抗体)结合，通过同位素、荧光或酶等标记技术加以放大和显示， 从而定性或定量显示细胞因子(或受体)的水平。
根据抗体性质和特异性不同，夹心法ELISA可分为：
1. PcAb与McAb夹心法
2. McAb与PcAb夹心法
3. 双McAb夹心法
4. 细胞、McAb夹心法
一、ELISA方法
ELISA法是应用最为广泛的非均相酶标免疫分析技术，ELISA法不仅可以用于细胞因子检测，也可用于可溶性细胞因子受体或可溶性粘附因子的测定
敏感性偏低
不能判断细胞因子的生物学活性。
ELISA
特异、简便
易于推广和标准化等优点
可同时检测大量标本且试验废弃物便于处理
细胞因子测定的首选方法
优点
缺点
二、流式细胞分析法
流式细胞分析法，是基于荧光抗体染色技术并借助流式细胞仪敏感的分辨力所建立的方法。该法主要用于细胞内细胞因子和细胞表面粘附分子的检测，通过特异性的荧光抗体染色，能简单、快速地进行单个细胞水平的细胞因子或粘附因子的检测，精确判断不同细胞亚群细胞因子和膜分子的表达情况。
1．分离和培养待检细胞
2．细胞固定
3．封闭非特异性结合位点
4．染色与分析
基本步骤