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安捷伦液相色谱仪公开课获奖课件赛课一等奖课件.ppt

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安捷伦液相色谱仪公开课获奖课件赛课一等奖课件.ppt

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太原市医达维科医药科技开发有限企业
使用措施
进样前准备
开机
仪器参数设定
打印数据汇报
数据分析告
HPLC使用措施
关机
开机
打开电脑
打开液相各模板电源(等待仪器自检)
双击仪器一联机
脱气(旋开冲气阀----设计流速)
仪器参数设定
开始编辑完整措施
泵参数设定自动进样器设定
柱温箱、检测器设定
素据分析
双击仪器一脱机
选择调用数据
积分
打印汇报
关机
关机前,先关灯
退出工作站,依次关其他模块电源
关闭计算机
有关高效液相操作的有关知识
流动相
1、 流动对应选用色谱纯试剂、高纯水或双蒸水,酸碱液及缓冲液需通过滤后使用,过滤时注意辨别水系膜和油系膜的使用范围;
2、 水相流动相需常常更换(一般不超过2天),防止长菌变质;
3、 使用双泵时,A、B、C、D四相中,若所用流动相中有含盐流动相,则A、D(进液口位于混合器下方)放置含盐流动相,B、C(进液口位于混合器上方)放置不含盐流动相; A、B、C、D四个储液器中其中一种为棕色瓶,用于寄存水相流动相。
有关高效液相操作的有关知识
色谱柱:
1、 使用前仔细阅读色谱柱附带的阐明书,注意合用范围,如pH值范围、流动相类型等;
2、 使用符合规定的流动相;
3、 使用保护柱;
4、 如所用流动相为含盐流动相,反相色谱柱使用后,先用水或低浓度甲醇水(如5%甲醇水溶液),再用甲醇冲洗。
5、 色谱柱在不使用时,应用甲醇冲洗,取下后紧密封闭两端保留;
6、 不要高压冲洗柱子;
7、 不要在高温下长时间使用硅胶键合相色谱柱;
有关高效液相操作的有关知识
反相色谱柱的清洗
作为一般C18柱,尤其是硅胶基质的一般C18柱,对酸碱盐以及水,都是导致柱子的损坏的流动相构成。水不能过多(除了带AQ的纯水柱,一般各家品牌均有这款防水柱) 。一般认为只要超过80%的水的流动相,都会导致C18的寿命缩短。因此做高水相的流动相分析时请注意选合适的柱子。酸对柱子的损伤是不可逆的,一定要控制PH,一般认为PH在2如下的都会对柱子导致致命损伤。碱性条件是对于硅胶基质的C18的弱项,一般的硅胶基质的C18碱性条件都不太耐用,但目前也有碱性PH11的柱子,但比较贵。盐对色谱柱的影响重要是盐析导致的,并且是致命。
有关高效液相操作的有关知识
冲洗措施根据使用的流动相和样品的不一样冲洗措施要加以辨别。一般不加酸碱盐,水相也不高的状况(如甲醇水60:40),无需太过冲洗,冲洗的目的就是为了把样品的杂质冲出即可。酸和碱的条件下,原则上是将酸碱冲杰出谱柱,保留在甲醇水即可(如60:40比例可根据要使用的流动相,只要水相不高即可)。盐的条件比较麻烦,处理不好,不仅仅色谱柱出问题并且仪器也比较麻烦。常用的就是高水相流动相甲醇-水(10:90)将盐冲出(注意压力),然后用纯甲醇冲洗(这一步是恢复高水相对色谱柱的损伤),最终保留在一般的甲醇水体系即可。

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