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DNA重组技术的基本工具概述(PPT 72页).pptx

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DNA重组技术的基本工具概述(PPT 72页).pptx

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又叫做基因拼接技术或DNA重组技术。通俗的说,就是按照人们的意愿,把一种生物的某种基因提取出来,加以修饰改造,然后放到另一种生物的细胞里,定向地改造生物的遗传性状。
原理:
操作水平:
结 果:
基因重组
DNA分子水平
定向地改造生物的遗传性状,获得人
类所需要的品种。
基因工程:

思考:为什么能把一种生物的基因“嫁接”到 另一种生物上并成功表达?
1、大多数生物的遗传物质都是DNA,且主要为双螺旋结构,即不同生物的DNA分子基本结构是相同的,都遵循碱基互补配对原则 。所以不同的生物DNA可以嫁接
2、地球上的所有生物共用一套遗传密码,所以,一种生物的基因可以在另外一种生物体内得以表达

DNA重组技术的基本工具
准确切割DNA的工具(“分子手术刀”)
——限制性内切酶
DNA片段的连接工具(“分子缝合针”)
——DNA连接酶
基因转移工具(“分子运输车”)
——基因进入受体细胞的载体

“分子手术刀”——限制性核酸内切酶(简称限制酶)
即一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列,并且能在特定的切点上切割DNA分子。
特 点:
存在原核生物 (主要是微生物)体内。
专一性
来 源:
作 用:
切断两个特定核苷酸之间的磷酸二酯键

中轴线
在G与A之间切割
大肠杆菌的一种限制酶(EcoRⅠ)只能识GAATTC
序列,并在G和A之间切开。
举例:

黏性末端
黏性末端
EcoRI限制酶的切割
被限制酶切开的DNA两条单链的切口,带有几个伸出的核苷酸,他们之间正好互补配对,这样的切口叫黏性末端。

SmaI只能识别CCCGGG序列,并在C和G之间切开。
中轴线
SmaI限制酶的作用
在G与C之间切割

平末端   平末端
SmaI限制酶的切割
当限制酶从识别序列的中心轴线处切开时,切开的DNA两条单链的切口,是平整的,这样的切口叫平末端。