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一、污染
（一）定义
是指在培养过程中，培养基或培养材料上滋生细菌、真菌等微生物，使培养材料不能正常生长导致培养失败的现象。
（二）常见的菌源
真菌和细菌
1、细菌污染一般在接种1-2天后即可发现，体现为培养基表面出现黏液状菌斑。
2、真菌污染一般在接种3天甚至10天以
后才体现出来，重要症状是培养基
上出现绒毛状菌丝，然后形成不一样
着色的孢子层。
（三）引起污染的原因：
1、培养基灭菌不彻底
2、外植体消毒不彻底
3、操作人员不遵守操作规程
4、无菌室和培养室环境不清洁
5、操作设备及使用工具消毒不彻底
（四）防止措施
1、防止材料带菌，材料预培养。
2、严格外植体灭菌。
3、培养基灭菌彻底。
4、严守无菌操作规程。
5、各室保持良好卫生。
（五）污染原因判断
1、若污染菌类是零星分散在培养基中，则可确定是人为引起的污染。若是外植体，菌类从材料培养基以上部分长起，且发生在5天后来，则阐明是材料带的内生菌。若从培养基如下开始长菌，发生时间较早，且有从里向外的趋势，则阐明是切口引起的污染。
2、真菌污染后，假如已形成孢子，则必须经高压灭菌后扔掉。但若是细菌污染，因此只要及时发现，将材料上部未感菌的部分剪下转接，材料仍可以用。
二、褐变
（一）定义
在组培过程中，培养材料向培养基中释放褐色物质，致使培养基逐渐变成褐色，培养材料也随之变褐死亡的现象。