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基因工程步骤
第1页
基因操作基础步骤
基因工程步骤
第2页








基因工程步骤
第3页
基因操作基础步骤
1)取得目标基因(目标基因获取 )
2)制备重组DNA分子(基因表示载体构建 )
3)转化受体细胞(将目标基因导入受体细胞)
4)筛选重组细胞
5)实现功效表示
目标基因检测和表示
基因工程步骤
第4页
当前被较广泛提取使用目标基因有: 苏云金杆菌抗虫基因、人胰岛素基因、人干扰素基因、种子贮藏蛋白基因、植物抗病基因等。
将需要基因从供体生物细胞内提取出来。
供体生物细胞
取出DNA
用限制酶剪去多出个别
目标基因
限制酶
(一)取得目标基因
基因工程步骤
第5页
目标基因提取方法
直接分离基因
人工合成基因
反转录法
依据已知氨基酸序列合成DNA
:鸟枪法
基因工程步骤
第6页
1)鸟枪法:
供体细胞中DNA
许多DNA片段
运载体
限制酶
与载体连接
载入
受体细胞
产生特定性状
导入
外源DNA扩增
目标基因
分离
(散弹射击法、直接分离法)
基因工程步骤
第7页
用DNA重组技术将某种生物总DNA用特定限制性内切酶切割成一个个片段,然后将这些片段随机地连接在一些质粒或其它载体上,再将它们转移到适当宿主细胞中,经过细胞增殖而组成各个片段无性繁殖系(克隆),当这些克隆多到能够包含某种生物全部基因时,这一批克隆总体就称为该种生物基因文库。
基因工程步骤
第8页
基因工程步骤
第9页
基因组DNA文库
cDNA文库
基因组DNA文库与cDNA文库比较
基因工程步骤
第10页

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